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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光PCR引物和探针稀释问题
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可帅儿

银虫 (正式写手)

[交流] 荧光PCR引物和探针稀释问题

想问一下大家平时稀释探针和引物用的是什么？
说明书上写的用TE溶液，但是我们这边没有，师兄说用无菌超纯水稀释就行了。
我心里不太放心，所以想请教一下。用水稀释会不会对引物保存产生不好影响吗？
还有稀释的浓度，说明书上写若是要稀释到10uM，那就得加（nmoles*100）ul的TE，跟着上面做没问题吧？ 稀释后可以放在振荡器上震荡混匀吗？会不会破坏引物和探针的结构？
十分感谢！本人新手一枚，疑问较多，金币较少，所以多多包涵
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1楼 2012-03-31 14:56:52
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atlanticwi

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
可帅儿(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+2, 我们也是用纯水稀释 2012-04-01 18:07:38
嗯...........
稀释的话只用无菌超纯水就行了，TE的话，EDTA可能会有对下游PCR反应产生影响。水稀释没有什么影响，请放心
之后稀释等过程，一切按说明书的流程来办就可以了，不用担心，出了任何问题，他们是要担责任的
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2楼2012-03-31 15:35:12
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atlanticwi

金虫 (正式写手)
忘了一句：探针引物记得避光..........................
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3楼2012-03-31 15:37:22
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可帅儿

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-03-31 15:35:12:
嗯...........
稀释的话只用无菌超纯水就行了，TE的话，EDTA可能会有对下游PCR反应产生影响。水稀释没有什么影响，请放心
之后稀释等过程，一切按说明书的流程来办就可以了，不用担心，出了任何问题，他们是要担 ...

谢谢你的帮助，这么说我就放心多了囧~~
我就怕哪里没做好，把实验给毁了什么的，呵呵
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4楼2012-03-31 15:41:06
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可帅儿

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-03-31 15:37:22:
忘了一句：探针引物记得避光..........................

这个倒是。。。
不知道外面有没有棕色的EP管卖
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5楼2012-03-31 16:01:49
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microk

铜虫 (初入文坛)
★
可帅儿(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
5楼: Originally posted by 可帅儿 at 2012-03-31 16:01:49:
这个倒是。。。
不知道外面有没有棕色的EP管卖

用锡纸包一下就可以了
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6楼2012-03-31 16:43:42
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可帅儿

银虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by microk at 2012-03-31 16:43:42:
用锡纸包一下就可以了

对对！我给忘了~铝箔也可以吧？
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7楼2012-04-01 09:07:02
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microk

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 可帅儿 at 2012-04-01 09:07:02:
对对！我给忘了~铝箔也可以吧？

一样的效果
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8楼2012-04-01 09:43:06
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小小微生物

金虫 (正式写手)
★
可帅儿(金币+1): 谢谢参与
无菌水可以  我就用过 没问题的  涉及到TE的都可以用无菌水代替的
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9楼2012-04-01 16:58:24
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neu234

木虫之王 (文学泰斗)
★
可帅儿(金币+1): 谢谢参与
飘过
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10楼2012-04-01 17:23:05
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可帅儿

银虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 小小微生物 at 2012-04-01 16:58:24:
无菌水可以  我就用过 没问题的  涉及到TE的都可以用无菌水代替的

好的~谢谢指教！
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11楼2012-04-02 20:54:02
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可帅儿12楼
2012-04-05 14:13   回复  
引用回帖:
10楼: Originally posted by neu234 at 2012-04-01 17:23:05: 飘过

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