应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教western blot 时蛋白稀释液情况
51/1返回列表
查看: 2663  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

heqin-1985

银虫 (小有名气)

[交流] 请教western blot 时蛋白稀释液情况

以前没有做WB，最近做了两个星期了，上一周用三蒸水稀释了一下蛋白使六个样品等蛋白，然后上的样，但一周做了基本没有结果，显影基本就是空白的片子，就一两个有条带，但不好。请教是不能用水稀释的原因吗，有人说要用蛋白裂解液稀释是吗，可以用PBS稀释吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-11-14 19:55:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mayina

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
heqin-1985(金币+1): 2011-11-18 21:45:50
用水稀释是可以的 是不是后边的步骤有问题？没显影原因很多的
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-11-17 19:15:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

lxy19870124

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
heqin-1985(金币+1): 2011-11-18 21:45:54
上样缓冲液稀释也行。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-11-17 10:56:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mayina

铜虫 (初入文坛)
heqin-1985(金币+1): 2011-11-18 21:45:40
补充下 有人说用TBST补齐也可以 我还没试过 尝试过再来回帖哈~
赞一下 回复此楼
4楼2011-11-17 19:16:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2011加油

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
heqin-1985(金币+2): 2011-11-18 21:45:35
呵呵，显影无结果，还有只是一两个条带，我建议你可以先跑一次胶后，看看考染的情况，观察你的目的蛋白和内参是否在胶上都有。如果观察到说明你的蛋白样品没问题，可以接着往下做。但后面转膜、孵育、显影等环节遇到的问题也很多，你可以摸索一下。

另外，你说的蛋白稀释成等浓度问题。我是先计算好蛋白上样量，由于各组蛋白浓度不一，可以采用TBST溶液来补齐各组的体积，再加5乘的loading buffer，最终加热变性，就行了。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-11-17 19:34:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学071000 329分求调剂 +5 我爱生物生物爱� 2026-03-17 5/250 2026-03-22 16:42 by tcx007
[考研] 305分求调剂（食品工程） +4 Sxy112 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:26 by 无懈可击111
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 070300化学319求调剂 +7 锦鲤0909 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:46 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国石油大学（华东） 本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:22 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 求调剂，一志愿:南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +7 困于星晨 2026-03-17 9/450 2026-03-20 17:38 by 无懈可击111
[考研] 广西大学家禽遗传育种课题组2026年硕士招生（接收计算机专业调剂） +3 123阿标 2026-03-17 3/150 2026-03-20 15:58 by 飞行琦
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[论文投稿] 申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭