应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教western blot 时蛋白稀释液情况
51/1返回列表
查看: 2637  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

heqin-1985

银虫 (小有名气)

[交流] 请教western blot 时蛋白稀释液情况

以前没有做WB，最近做了两个星期了，上一周用三蒸水稀释了一下蛋白使六个样品等蛋白，然后上的样，但一周做了基本没有结果，显影基本就是空白的片子，就一两个有条带，但不好。请教是不能用水稀释的原因吗，有人说要用蛋白裂解液稀释是吗，可以用PBS稀释吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-11-14 19:55:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxy19870124

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
heqin-1985(金币+1): 2011-11-18 21:45:54
上样缓冲液稀释也行。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-11-17 10:56:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mayina

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
heqin-1985(金币+1): 2011-11-18 21:45:50
用水稀释是可以的 是不是后边的步骤有问题？没显影原因很多的
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-11-17 19:15:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mayina

铜虫 (初入文坛)
heqin-1985(金币+1): 2011-11-18 21:45:40
补充下 有人说用TBST补齐也可以 我还没试过 尝试过再来回帖哈~
赞一下 回复此楼
4楼2011-11-17 19:16:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2011加油

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
heqin-1985(金币+2): 2011-11-18 21:45:35
呵呵，显影无结果，还有只是一两个条带，我建议你可以先跑一次胶后，看看考染的情况，观察你的目的蛋白和内参是否在胶上都有。如果观察到说明你的蛋白样品没问题，可以接着往下做。但后面转膜、孵育、显影等环节遇到的问题也很多，你可以摸索一下。

另外，你说的蛋白稀释成等浓度问题。我是先计算好蛋白上样量，由于各组蛋白浓度不一，可以采用TBST溶液来补齐各组的体积，再加5乘的loading buffer，最终加热变性，就行了。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-11-17 19:34:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 heqin-1985 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研复试调剂，过国家线的同学都可报名 +3 黑！在干嘛 2026-02-28 4/200 2026-03-02 12:20 by 花鱼不是鱼
[考研] 268求调剂 +4 简单点0 2026-03-02 5/250 2026-03-02 11:54 by ms629
[考研] 哈工大计算机刘劼团队招生 +4 hit_aiot 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:53 by 一声问好
[考研] 276求调剂 +4 路lyh123 2026-02-28 5/250 2026-03-02 11:20 by yuchj
[考研] 材料学硕318求调剂 +14 February_Feb 2026-03-01 16/800 2026-03-02 11:17 by yuchj
[考研] 0854复试调剂 276 +4 wmm9 2026-03-01 6/300 2026-03-02 09:28 by 热情沙漠
[考研] 282求调剂 +3 2103240126 2026-03-02 4/200 2026-03-02 09:25 by 汪！？！
[考研] 322求调剂 +3 熊境喆 2026-03-01 3/150 2026-03-02 08:44 by houyaoxu
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[基金申请] 刚录用，没有期刊号，但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭