应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白纯化问题
51/1返回列表
查看: 2040  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

C-JingX

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白纯化问题

求助：包涵体纯化，方法是镍柱亲和层析，问题是每次蛋白都在洗杂蛋白时被洗下来，尝试了很多方法，不知道怎么优化？还有个疑问是，组氨酸只有6个，但目的蛋白有100多KDa，会不会是因为蛋白太大，6个组氨酸与镍柱的亲和力无法承受这么大蛋白，就像常用的粘钩一样，挂太重的东西就会直接掉下来呢？？？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生物实验及蛋白纯化结晶相关链接 蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
走自己的路，不要追逐别人的脚步！
1楼 2011-09-25 11:19:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

256k

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-11-07 21:42:20
C-JingX(金币+2): 谢谢啊！ 2011-11-09 09:49:28
不挂柱可能是蛋白在折叠过程中his标签被折叠到蛋白内部，基本无解
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-11-07 20:37:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

aayqaa

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

C-JingX(金币+1): 如果是不能结合的话，那上样的时候就应该直接流出来了啊，怎么还会在杂蛋白里面呢？？ 2011-09-26 10:01:45
组氨酸部分可能碰巧被包裹在了蛋白的内部导致无法结合
赞一下 回复此楼
2楼2011-09-25 19:32:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

丙氨酸密码子

新虫 (小有名气)
★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-09-26 22:59:53
我现在还没做到这一步呢，哎，，我还在艰难的徘徊在PCR上面，提RNA，RT-PCR啊，，， 郁闷啊。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-09-25 19:48:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流! 2011-09-26 23:00:14
已经也碰到过几个蛋白是这种情况，无解。
你可以试试变性后纯化或复性后纯化，看有没有区别。
赞一下(1人) 回复此楼
生物资源交流QQ群：1044518333
4楼2011-09-25 19:54:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭