| 查看: 8197 | 回复: 15 | |||
| 本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
yesucao木虫 (正式写手)
|
[求助]
琼脂糖凝胶电泳，跑的条带有点难看
|
||
|
这个是我酶切之后跑的电泳图，除了Marker和一个PCR的产物跑的条带是直线型的，怎么其他酶切的都好像跑的稍微有点快了？？呈现那种所谓的微笑状，请各位虫虫帮忙分析一下原因。缓冲液？胶？还是本身质粒没有提好？？？ 底下的小片段是目的条带，大小应该和PCR的产物是一样的大小，但是从图片上看的话就是要小一些。 之前因为RNA酶的问题，所以最近的几次提质粒都没有进行消化，图片有点难看，望各位见谅！！  |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有151人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 琼脂糖凝胶电泳条带出现拖尾，条带为笑脸状，为何？
已经有10人回复
- 量子点跑琼脂糖凝胶电泳，跑的时间越长，条带的荧光越弱，怎么回事？
已经有4人回复
- 琼脂糖凝胶电泳
已经有6人回复
- 急！各位帮忙看看，PCR后跑的琼脂糖凝胶电泳图，条带不清晰原因是什么？
已经有16人回复
- 10电泳条带 跑成这样是怎么回事
已经有4人回复
- 请教基因载体跑琼脂糖凝胶电泳的结果无条带问题
已经有11人回复
- 琼脂糖凝胶电泳的Marker为什么会出现“山”字样的条带
已经有6人回复
- 琼脂糖凝胶电泳marker跑不好，怎么办
已经有9人回复
- 琼脂糖凝胶电泳后发现目的条带偏大是什么原因
已经有6人回复
- 琼脂糖凝胶电泳背景一半白一半黑
已经有15人回复
- 琼脂糖凝胶电泳怎么看
已经有6人回复
- 求助琼脂糖凝胶电泳！！marker拖尾得厉害
已经有12人回复
- 琼脂糖凝胶电泳跑成这样是什么原因？
已经有11人回复
- 琼脂糖凝胶电泳时，只有泳道两边发亮，中间没有条带
已经有9人回复
- 琼脂糖凝胶电泳
已经有10人回复
- 琼脂糖凝胶电泳
已经有11人回复
- 琼脂糖凝胶电泳跑的时间长了是不是就会出现拖尾呀？
已经有10人回复
- 琼脂糖凝胶电泳问题
已经有14人回复
- 琼脂糖凝胶电泳结果
已经有6人回复
- 琼脂糖凝胶电泳
已经有10人回复
- 【求助/交流】琼脂糖凝胶电泳Marker跑的很不正常啊
已经有14人回复
- 【求助/交流】急！！！琼脂糖凝胶电泳的问题，跑不出条带了！！
已经有8人回复
- 【求助/交流】琼脂糖凝胶电泳条带呈梳子形是怎么回事
已经有8人回复
- 【求助/交流】难看的琼脂糖电泳谱图
已经有9人回复
2楼2011-08-13 19:33:00
qingyuansw20
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 4
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 382.5
- 散金: 21
- 红花: 3
- 帖子: 217
- 在线: 67.2小时
- 虫号: 1050181
- 注册: 2010-07-01
- 专业: 细胞增殖、生长与分化
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5): Good 2011-08-14 09:06:46
西瓜(MolEPI+1): 补上 2011-08-14 09:07:12
yesucao(金币+5): 恩，你的建议我会认真采纳的 2011-08-14 09:43:43
西瓜(金币+5): Good 2011-08-14 09:06:46
西瓜(MolEPI+1): 补上 2011-08-14 09:07:12
yesucao(金币+5): 恩，你的建议我会认真采纳的 2011-08-14 09:43:43
|
原因分析： 1、胶不匀称。胶不匀称自然就要出现不规则图形。但从上图看N多都是月牙形，所以我感觉不大可能是胶不匀称。 2、电压不稳。电压不稳，会对质粒的牵引力发生扭曲。自然也要不规则。可以加大电压解决问题。或者换新缓冲液。一般是以正负极距离为准。1cm为5个电压。跑胶不超过1h。 建议，把跑胶的槽子等，全部清洗干净，烘干。换新的缓冲液，加电压120V以上，50min。 |
9楼2011-08-13 22:57:44
yesucao
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 2
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 3877.1
- 散金: 45
- 红花: 6
- 帖子: 374
- 在线: 203.4小时
- 虫号: 810829
- 注册: 2009-07-17
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2011-08-13 20:25:20
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
amisking(金币+4, MolEPI+1): 鼓励应助 2011-08-13 21:29:51
yesucao(金币+4): 说的有道理，今后我会注意的 2011-08-13 22:49:40
amisking(金币+4, MolEPI+1): 鼓励应助 2011-08-13 21:29:51
yesucao(金币+4): 说的有道理，今后我会注意的 2011-08-13 22:49:40
|
按理你其他都不会，那与电压也无关啊，要是电压有关系，全都这样了，这个更说不过去，不过你的电压也太小了，一般要在120以上，150以下会比较好。 我看你基本都是笑脸，这个与样品基本上没关系了，我还是认为与配胶有关。 另外，你拔梳子时也要注意，如果加样孔不规整，或梳子不干净引入了脏东西也是有可能的，你可以把梳子洗干净些，然后拔时快点，毕竟是DNA电泳，胶不平整我觉得很正常，如SDS电泳竖直的，有卡板，就比较少见。 |
4楼2011-08-13 20:41:57
5楼2011-08-13 20:46:30
xbl3688
银虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 1240.1
- 红花: 1
- 帖子: 311
- 在线: 104.7小时
- 虫号: 1348397
- 注册: 2011-07-17
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2011-08-13 20:52:48
yesucao
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 2
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 3877.1
- 散金: 45
- 红花: 6
- 帖子: 374
- 在线: 203.4小时
- 虫号: 810829
- 注册: 2009-07-17
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
7楼2011-08-13 22:54:20
yesucao
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 2
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 3877.1
- 散金: 45
- 红花: 6
- 帖子: 374
- 在线: 203.4小时
- 虫号: 810829
- 注册: 2009-07-17
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
8楼2011-08-13 22:55:59
yesucao
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 2
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 3877.1
- 散金: 45
- 红花: 6
- 帖子: 374
- 在线: 203.4小时
- 虫号: 810829
- 注册: 2009-07-17
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
10楼2011-08-13 23:00:21
5