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daiguoying

木虫 (小有名气)

[求助] 求助各位虫友--去除PCR产物中的3‘端A尾

各位虫友,PCR遇到一个棘手问题,请教大家了:

我用LA tag酶 扩增质粒全长,但会得到末端带A,这是我不需要的,怎样去除末端A
用pfu可以吗?用量多少,怎样操作,查文献没找到呢,谢啦~~
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DO NOT LOSE TIME
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yabxxh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
daiguoying(金币+50): 谢谢,话说我买错酶了,本来要买primerstar的,买成LAtag了 2011-06-08 18:12:38
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-08 18:53:58
3.2kb对于一般的pfu来说太困难了,所以,TAKARA的primer Star是不二的选择,试一试吧,呵呵,好运
7楼2011-06-08 15:30:05
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daiguoying

木虫 (小有名气)

顶啊,各位高人求指点啊~~
DO NOT LOSE TIME
2楼2011-06-07 20:16:14
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

换一个酶就行了,酶很多的
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2011-06-07 21:08:28
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daiguoying

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-06-07 21:08:28:
换一个酶就行了,酶很多的

你好,我因为要P一个3200bp的质粒,所以就买了LAtag酶...据说可以用pfu酶72度反应,但具体的反应时间不清楚,有哪位高人晓得~~万分感激~~啊
DO NOT LOSE TIME
4楼2011-06-07 22:01:14
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