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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于双酶切位点的选择及其条件
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wolaiyefeng

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 关于双酶切位点的选择及其条件

求助：请问有谁知道双酶切位点选择时应该考虑哪些方面的因素啊？另外如果选择的某一酶切位点事甲基化了的话，对酶连 有什么影响？？？

[ Last edited by wolaiyefeng on 2011-4-25 at 22:39 ]
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1楼 2011-04-25 22:28:52
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-04-26 19:04:44
首先你所选的两个酶切在你的基因中不要存在。
其次如果用那些酶切buffer还有N多种的那些酶的话，得考虑buffer的兼容性。（其实现在很多酶都用通用的buffer了。）

如果选择的某一酶切位点甲基化，可能会导致酶切不动，你就找甲基化缺陷型菌株转质粒，提质粒，再切吧。（会出现这问题吗？没遇到过啊。）

PS：楼上打广告，等咔嚓咔嚓吧。
赞一下(1人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
3楼2011-04-26 17:07:44
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查看全部 4 个回答

sunbio

禁言 (小有名气)
wolaiyefeng(金币+1): 非常感谢！！！ 2011-04-26 15:53:43
西瓜:编辑内容 2011-04-26 17:18
本帖内容被屏蔽
2楼2011-04-26 10:55:35
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cxl_yll

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5): good 2011-04-27 16:55:03
1.要看是否只有单一酶切位点
2看是否有共同的缓冲溶液
3看单个酶在共同缓冲溶液的活性
4如果有甲基化的话，先转化到甲基化缺陷菌，再提质粒继续做...
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-04-26 22:10:59
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