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wolaiyefeng

铁杆木虫 (小有名气)

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[求助] 关于双酶切位点的选择及其条件

求助：请问有谁知道双酶切位点选择时应该考虑哪些方面的因素啊？另外如果选择的某一酶切位点事甲基化了的话，对酶连有什么影响？？？

[ Last edited by wolaiyefeng on 2011-4-25 at 22:39 ]

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1楼 2011-04-25 22:28:52

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susizheng

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-04-26 19:04:44

首先你所选的两个酶切在你的基因中不要存在。
其次如果用那些酶切buffer还有N多种的那些酶的话，得考虑buffer的兼容性。（其实现在很多酶都用通用的buffer了。）

如果选择的某一酶切位点甲基化，可能会导致酶切不动，你就找甲基化缺陷型菌株转质粒，提质粒，再切吧。（会出现这问题吗？没遇到过啊。）

PS：楼上打广告，等咔嚓咔嚓吧。