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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】pcr无结果
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hliang

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】pcr无结果

Sample Text
我刚开始做pcr,两次都没有结果，完全没有条带，连引物的带都没有。只有buffer暗带。maker的带也不是很清楚，可能是胶有点厚，大家有过这方面的经验没有？给点提示。谢谢了。
pcr体系是
ddH2O  13.05ul
R          1.2ul
F           1.2ul
10×buffer  2ul
dNTP      0.4ul
tap    0.15ul
模板  2ul
设的有退火梯度53.8   55.2   57.2   59.1

[ Last edited by hliang on 2011-3-29 at 08:20 ]
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1楼 2011-03-29 08:16:14
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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)
★
lstt09nk(金币+1): 重新做是必要的，楼主的体系可能就有问题 2011-03-29 15:33:09
hliang(金币+2): 2011-04-04 09:17:54
MARKer都不清楚……
重新做呗……问下师兄师姐，或者让别人给你做一轮试试
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3楼2011-03-29 09:07:49
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smiled001

禁虫 (小有名气)
★
lstt09nk(金币+1): 感谢参与，鼓励交流 2011-03-29 15:33:22
hliang(金币+2): 2011-04-04 09:18:13
本帖内容被屏蔽
4楼2011-03-29 09:21:52
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天使托

专家顾问 (职业作家)
★ ★
lstt09nk(金币+2): 是的 2011-03-29 15:33:31
引物和模板加的也太多了吧？一般50ul体系模板和引物才各加1ul
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5楼2011-03-29 14:57:52
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65900931

银虫 (小有名气)
告诉人家各组分的体积是没有意义的，应该说出各组分的终浓度。还有个关键参数是循环数。
赞一下 回复此楼
6楼2011-03-29 20:59:51
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wuw579

铁杆木虫 (正式写手)
hliang(金币+3): 2011-04-04 09:19:03
hliang(金币+3): 2011-04-09 17:30:51
循环数可以设为40   再加点镁离子   也可以换酶   
你的目的片段多长，GC多吗？  可能是酶和缓冲液不合适
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7楼2011-04-01 10:52:17
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yabxxh

木虫 (正式写手)
你这没有图片怎么看啊
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8楼2011-04-01 11:00:10
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hliang

新虫 (初入文坛)
谢谢。已经做出来了.
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9楼2011-04-09 17:31:16
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维维Vivi2楼
2011-03-29 08:50   回复  
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