| 查看: 2746 | 回复: 13 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】RNA质量与qRT-PCR
|
|||
如图，RNA里有少量基因组DNA残留，这样的RNA如果反转，做定量的话会对结果产生什么样的影响？为了少量的DNA去处理一下担心会出现别的问题。另外有的RNA出现260/230过低的现象，不知道各位大神怎么解决的，请教一下。 |
回复此楼» 猜你喜欢
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有88人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 提取的RNA暂时不用存放在多少度不会影响其质量啊
已经有18人回复
- 帮忙鉴定下这个水稻叶片RNA怎么回事?
已经有5人回复
- trizol提取副溶RNA RT-PCR
已经有9人回复
- 重金求助QRT-PCR 内参问题
已经有1人回复
- 【求助/交流】RNA质量检测OD值的意义？
已经有6人回复
- 【求助/交流】RNA浓度和质量检测
已经有11人回复
- 【求助/交流】qRT-PCR
已经有16人回复
- 【求助/交流】求助高手-棉花中RNA提取质量验证及反转后cDNA质量验证问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】关于qrt pcr
已经有8人回复
- 【求助/交流】RNA提的不好，基本都降解的话，逆转录后再PCR会是什么结果？
已经有20人回复
- 【求助/交流】有关qRT-PCR的问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】RNA的提取问题和qRT-PCR分析基因在不同时间的定量表达
已经有10人回复
7788945(金币+3): 2011-03-22 19:17:43
|
你RNA的量很大啊，完全不用担心浓度问题了，所以抽提去上清的时候就取少一点吧。 个人经验，260/230偏小的话，提取时可以改进以下几点： 1. 加氯仿抽提后取少一点上清，不要贪多。 2.加乙醇洗的时候，多晃几次，尽量让RNA沉淀整片悬浮起来（有时候确实浮不起来也没办法。） 3.弃乙醇的时候，用枪吸而不是倾倒，倒的话经常有液滴留在管壁上，倒不干净。第一次用蓝枪头吸，可以不完全吸干，免得吸到沉淀；然后短暂离心把残余酒精甩到管底，看准了用白枪头尽量吸干净。RNA量大，被白枪头弄掉一点也没关系。 4.溶解前晾干的时间可以长一点，5分钟也没关系的。标准的做法说是不能晾太久，等沉淀开始变透明就要加水溶解，但是我晾过10分钟的，后面RNA量也很大。可能量大，虽然有些溶解不了，最后浓度还是高。 可能不完全正确，但是以前我出现过260/230偏小的问题，按上面方法改进了操作，后面就好了。 |
11楼2011-03-22 19:12:32
2楼2011-03-21 15:43:56
3楼2011-03-21 15:56:47
4楼2011-03-21 18:39:58