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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 【求助】果胶酶活力的测定
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冬青花语

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】果胶酶活力的测定

参考文献中常提到的果胶酶活力测定方法主要有粘度法，纳尔逊-索模吉法，脱胶作用时间法，滴定法，α-氰基乙酰胺比色法，DNS比色法。。请教各位大虾，哪种方法比较简便、准确？有做过的指导一下哈，thanks。
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1楼 2011-03-02 10:20:53
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yidiniaoren

铜虫 (正式写手)
★
冬青花语(金币+1):谢谢参与
只用过DNS比色法，但是灭酶后的对照组颜色比没灭酶的还要深，郁闷啊。
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2楼2011-03-26 19:34:31
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ygztj2008

铜虫 (初入文坛)
★
冬青花语(金币+1):谢谢参与
我认为滴定法比较好
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4楼2011-04-13 18:53:08
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朝天门上的王

金虫 (职业作家)
★
冬青花语(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by xjr_528 at 2011-04-14 13:56:45:
针对QB1502—92标准测定方法测定高活力果胶酶、固定化果胶酶活力存在的实验误差大，重现性及灵敏度差的缺陷，提出了利用3，5-二硝基水杨酸与醛糖共热产生棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量和含有呈色氨 ...

最近在测果胶酶活，DNS法，很疑惑啊...，用的10g/L的果胶底物，以dns为空白测定，吸光值超出了很多？我是以4000r/min离心后没有分层，而且，对照组与测定组的值相差也很小只有0.00xx，不晓得是什么原因

[ Last edited by 朝天门上的王 on 2011-7-3 at 20:59 ]
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7楼2011-07-02 16:46:44
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raaishenghuo

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
冬青花语(金币+1):谢谢参与
junwen6516(金币+1): 鼓励发帖交流 2011-10-11 19:58:04
我用DNS法测的，灭活之后的吸光度竟比没灭活的还要大。还不知道是什么原因。
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9楼2011-10-11 18:47:27
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普通回帖

媛儿de

新虫 (初入文坛)
★
冬青花语(金币+1):谢谢参与
DNS法
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3楼2011-04-13 14:57:36
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小损样儿

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
冬青花语(金币+1):谢谢参与
树树8013(金币+1): 谢谢与楼主的交流解答，辛苦了。 2011-04-14 13:43:08
粘度法用来测定果胶酶的复合酶活力比较准确,但操作过程也相对复杂,且测定灵敏度不高。滴定法设备使用简单,测试重现行好,准确度高,但测定时间长,过程较繁琐,试剂用量较大。 而DNS比色法测定的灵敏度、 准确度均高,重现性好,试剂用量少,尤其是操作省时、简便。
我建议你使用DNS比色法。
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5楼2011-04-14 09:55:56
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xjr_528

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
冬青花语(金币+1):谢谢参与
树树8013(金币+2): 谢谢解答，食品板块欢迎你常来。 2011-04-14 22:26:34
针对QB1502—92标准测定方法测定高活力果胶酶、固定化果胶酶活力存在的实验误差大，重现性及灵敏度差的缺陷，提出了利用3，5-二硝基水杨酸与醛糖共热产生棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量和含有呈色氨基化合物的反应液颜色深浅成正比的原理，在540 nm下测其吸光度，从而计算出果胶酶活力的测定方法，并对测定步骤、影响因素及测定中可能出现的问题进行了试验研究。结果表明，该方法简便、准确、重现性高，适合高活力果胶酶和固定化果胶酶活力的测定。
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6楼2011-04-14 13:56:45
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panxs

新虫 (初入文坛)
★
冬青花语(金币+1):谢谢参与
我测木瓜蛋白酶，同样一头雾水。郁闷啊
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8楼2011-07-03 11:27:50
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yidiniaoren

铜虫 (正式写手)
★
冬青花语(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
2楼: Originally posted by yidiniaoren at 2011-03-26 19:34:31:
只用过DNS比色法，但是灭酶后的对照组颜色比没灭酶的还要深，郁闷啊。

是啊是啊，我也是这样，做了好几次都这样，不知道问题出在哪里。。。郁闷到了极致
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10楼2011-10-17 18:33:08
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yidiniaoren

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xjr_528 at 2011-04-14 13:56:45:
针对QB1502—92标准测定方法测定高活力果胶酶、固定化果胶酶活力存在的实验误差大，重现性及灵敏度差的缺陷，提出了利用3，5-二硝基水杨酸与醛糖共热产生棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量和含有呈色氨 ...

我用DNS测酶活，但是对照的OD值比样品的OD值还要高。。。泪奔啊，做了好几次都这样，酶我都灭活了啊
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11楼2011-10-19 17:01:10
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517358403

铁虫 (小有名气)
★
冬青花语(金币+1):谢谢参与
好像是底物分解了，我当初做木聚糖的时候就是的
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12楼2012-02-25 17:13:50
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zx4969

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
hsd3521: 金币+1, 鼓励新虫交流，欢迎常来 2012-07-12 20:37:32
我也是，我用了国标法和比色法，都做不出来，我都怀疑是果胶的问题了
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13楼2012-07-10 11:06:09
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woleyuan

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by yidiniaoren at 2011-03-26 19:34:31
只用过DNS比色法，但是灭酶后的对照组颜色比没灭酶的还要深，郁闷啊。

空白样溶液颜色确实浅，但是测的吸光度值确实很高，有的甚至比实验组还要高。
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14楼2013-05-24 16:52:28
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woleyuan

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by yidiniaoren at 2011-03-26 19:34:31
只用过DNS比色法，但是灭酶后的对照组颜色比没灭酶的还要深，郁闷啊。

我做的空白组的颜色倒是不深，但是测的值很大。
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15楼2013-05-24 17:28:04
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蝴蝶110

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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14楼: Originally posted by woleyuan at 2013-05-24 16:52:28
空白样溶液颜色确实浅，但是测的吸光度值确实很高，有的甚至比实验组还要高。...

我也出现了这种情况，，OD差值有的居然是负值，，，郁闷啊，，，
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16楼2013-07-08 09:37:49
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liqq

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
那肿么办呢？是不是果胶单糖含量太高了，所以对照组的OD值很高？我现在怀疑，聚半乳糖醛酸和果胶不是一回事儿，是不是要把底物换成聚半乳糖醛酸？
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17楼2014-03-09 11:42:16
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蔻思妮

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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2楼: Originally posted by yidiniaoren at 2011-03-26 19:34:31
只用过DNS比色法，但是灭酶后的对照组颜色比没灭酶的还要深，郁闷啊。

同学你好，你这个问题后来是怎么解决的呢？
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18楼2014-11-07 11:42:26
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蔻思妮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 朝天门上的王 at 2011-07-02 16:46:44
最近在测果胶酶活，DNS法，很疑惑啊...，用的10g/L的果胶底物，以dns为空白测定，吸光值超出了很多？我是以4000r/min离心后没有分层，而且，对照组与测定组的值相差也很小只有0.00xx，不晓 ...

同学你好，你这个问题后来是怎么解决的呢？
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19楼2014-11-07 11:43:44
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蔻思妮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by raaishenghuo at 2011-10-11 18:47:27
我用DNS法测的，灭活之后的吸光度竟比没灭活的还要大。还不知道是什么原因。

同学你好，你这个问题后来是怎么解决的呢？
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20楼2014-11-07 11:44:07
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蔻思妮

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by zx4969 at 2012-07-10 11:06:09
我也是，我用了国标法和比色法，都做不出来，我都怀疑是果胶的问题了

同学你好，你这个问题后来是怎么解决的呢？
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21楼2014-11-07 11:45:00
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蔻思妮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by woleyuan at 2013-05-24 16:52:28
空白样溶液颜色确实浅，但是测的吸光度值确实很高，有的甚至比实验组还要高。...

同学你好，你这个问题后来是怎么解决的呢？
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22楼2014-11-07 11:45:24
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一个小奋斗

禁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
23楼2018-09-11 11:07:30
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