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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】构建表达载体时，提质粒用小提够用吗？
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匿名

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1楼 2010-12-21 13:14:32
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2010-12-21 14:36:54
足够了，先试一下
如果发现表达成功需要大批量做实验了再考虑大抽也不迟
另外，你是转真核细胞吗？最好考虑去内毒素的问题，不然某些敏感的细胞会死得很难看。
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2楼2010-12-21 13:16:29
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匿名

用户注销 (著名写手)
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3楼2010-12-21 13:20:45
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rioarsenal

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-21 14:36:59
载体构建，1-5微克足够了，应该能连上。

小提的话，量应该在1微克以上
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4楼2010-12-21 13:31:47
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by NXYLGL2008 at 2010-12-21 13:20:45:

我提取质粒后酶切，然后直接转基因，小提是不是量不够？另外我提取后然后没酶切后量就很少了，有些时候回收就一点也没有了。。。。

我不明白你这里的转基因是什么意思。
回收量很少，除了考虑优化实验之外，还看你的试剂盒是不是很菜
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5楼2010-12-21 16:42:35
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飞鸟and唐山

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-21 13:16:29
足够了，先试一下
如果发现表达成功需要大批量做实验了再考虑大抽也不迟
另外，你是转真核细胞吗？最好考虑去内毒素的问题，不然某些敏感的细胞会死得很难看。

您好，请问内毒素是在哪一步去除呢？
赞一下 回复此楼
加油！
6楼2013-07-13 21:21:50
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