| 查看: 2281 | 回复: 9 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】菌落PCR扩出来的片段不是目的片段，咋办啊？？？？ 已有6人参与
|
|||
| 今天两次菌落PCR，扩出来的片段都不是目的片段。最初P的是菌的16S，用的是通用引物27F和1492R，扩出来1500bp左右的16S片段，然后将PCR产物切胶回收纯化，并且已检测了回收产物，是1500左右。然后做连接，连接到pMD19—T载体上，转化JM109感受态，次日，平板上长出菌落，白斑居多，蓝斑数个，挑取白斑做菌落PCR，引物用M13，电泳检测PCR产物，条带居然在500bP处！！！吓我一跳！我做了两次了，两次一共挑了19个白斑了，扩出来都是500bp的。怎么回事啊这是？？？？？请大侠们解释一下。感激涕零！！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有111人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR时出现了非目的片段的超大片段条带
已经有16人回复
- 反转录之后PCR扩增片段问题的请教，急急急
已经有5人回复
- 大片段PCR扩增求助
已经有34人回复
- 求解释！PCR产物在目的区有很亮的拖尾！需要回收目的片段！怎么办啊?
已经有22人回复
- 高GC含量基因片段PCR问题
已经有13人回复
- 载体连接pcr片段一直连不上
已经有17人回复
- 重叠PCR克隆大片段
已经有4人回复
- 请教各位前辈 为什么我做菌落PCR总也P不出来
已经有28人回复
- 连接转化后菌落PCR验证出现非特异性扩增
已经有5人回复
- PCR总是无法正确扩增所需片段，问题在哪？
已经有6人回复
- 【求助/交流】长片段PCR
已经有10人回复
- 【求助/交流】请问PCR后的电泳只目的片段不清晰，并且出现引物带，应该从哪些方面调整
已经有6人回复
- 【求助/交流】为什么PCR扩增产物片段长度比设计时的要长很多？
已经有10人回复
- 【求助/交流】PCR扩增核心片段，再也扩不出来了，怎么办
已经有16人回复
- 【求助/交流】5500bp的片段PCR问题
已经有21人回复
- 【求助/交流】以cDNA为模板PCR扩增目的片段时条带较浅原因
已经有13人回复
五柳
木虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 2567.8
- 散金: 446
- 红花: 1
- 帖子: 409
- 在线: 297.6小时
- 虫号: 1167004
- 注册: 2010-12-10
- 专业: 环境工程
5楼2010-12-14 22:04:12
waiwaidou_1983
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 31.3
- 散金: 703
- 红花: 3
- 帖子: 275
- 在线: 43.8小时
- 虫号: 475342
- 注册: 2007-12-07
- 性别: MM
- 专业: 植物生理与生化
2楼2010-12-14 21:15:54
3楼2010-12-14 21:54:00
scelab
荣誉版主 (文坛精英)
小木虫之有关部门负责人
- 应助: 63 (初中生)
- 贵宾: 1.475
- 金币: 8294.6
- 散金: 4158
- 红花: 39
- 沙发: 99
- 帖子: 21277
- 在线: 3169.3小时
- 虫号: 482065
- 注册: 2007-12-20
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
4楼2010-12-14 21:59:29
10