应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】酶切位点重合了的两个酶的酶切问题
51/1返回列表
查看: 2169  |  回复: 13
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

恒星年

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】酶切位点重合了的两个酶的酶切问题已有2人参与

各位高手，我现在要做一个基因的克隆，上游引物只能用NcoI，下游只能用BamHI，但是在载体上这两个酶的酶切位点是重合的，切了一个另外一个就不能切了，应该怎么办啊？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2010-11-05 17:59:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
★ ★
reasonspare(金币+2):眼睛要保护 2010-11-10 10:37:34
引用回帖:
Originally posted by amilie030312 at 2010-11-08 16:00:52:
是否可以先切NcoI，用酶补平之后再加几个碱基在前面，再切BamHI，不知道这样是否可行，非要切这样可以试试，能不能做出来就不知道了

此方法不可行，NcoI单酶切完了之后进行补平，把刚产生的NcoI的粘性末端也补平了，之后用BamHI确实有可能切开，但得不到NotI的粘性末端

[ Last edited by 空谷幽风 on 2010-11-8 at 17:13 ]
赞一下(1人) 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
10楼2010-11-08 17:05:42
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

恒星年

银虫 (正式写手)
怎么没人进来啊？自己顶个先
赞一下 回复此楼
2楼2010-11-05 18:35:08
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hnndpt

铁虫 (正式写手)
恒星年(金币+1):谢谢，但是应该是有办法解决的 2010-11-05 19:03:38
估计得重新构建载体了
赞一下 回复此楼
3楼2010-11-05 18:51:15
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hnndpt

铁虫 (正式写手)
估计得重新构建载体了
赞一下 回复此楼
4楼2010-11-05 18:51:27
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭