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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】酶切位点重合了的两个酶的酶切问题
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恒星年

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】酶切位点重合了的两个酶的酶切问题 已有2人参与

各位高手，我现在要做一个基因的克隆，上游引物只能用NcoI，下游只能用BamHI，但是在载体上这两个酶的酶切位点是重合的，切了一个另外一个就不能切了，应该怎么办啊？
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1楼 2010-11-05 17:59:42
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hnndpt

铁虫 (正式写手)
估计得重新构建载体了
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4楼2010-11-05 18:51:27
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恒星年

银虫 (正式写手)
怎么没人进来啊？自己顶个先
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2楼2010-11-05 18:35:08
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hnndpt

铁虫 (正式写手)
恒星年(金币+1):谢谢，但是应该是有办法解决的 2010-11-05 19:03:38
估计得重新构建载体了
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3楼2010-11-05 18:51:15
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
恒星年(金币+2):谢谢，我去学习下这个方法怎么用，呵呵 2010-11-09 10:29:36
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-11-08 12:16:51:
单酶切连接了。

他设计的双酶切连接，你觉得单酶切连接的方案能行吗？
楼主有没有做过重组，就是设两条带重组臂的上下游引物，重新扩片段，载体经单酶切后把片段用重组酶重组到目标载体那
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
6楼2010-11-08 13:15:22
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