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恒星年

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】酶切位点重合了的两个酶的酶切问题 已有2人参与

各位高手,我现在要做一个基因的克隆,上游引物只能用NcoI,下游只能用BamHI,但是在载体上这两个酶的酶切位点是重合的,切了一个另外一个就不能切了,应该怎么办啊?
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hnndpt

铁虫 (正式写手)

估计得重新构建载体了
4楼2010-11-05 18:51:27
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查看全部 14 个回答

恒星年

银虫 (正式写手)

怎么没人进来啊?自己顶个先
2楼2010-11-05 18:35:08
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hnndpt

铁虫 (正式写手)

恒星年(金币+1):谢谢,但是应该是有办法解决的 2010-11-05 19:03:38
估计得重新构建载体了
3楼2010-11-05 18:51:15
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

恒星年(金币+2):谢谢,我去学习下这个方法怎么用,呵呵 2010-11-09 10:29:36
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-11-08 12:16:51:
单酶切连接了。

他设计的双酶切连接,你觉得单酶切连接的方案能行吗?
楼主有没有做过重组,就是设两条带重组臂的上下游引物,重新扩片段,载体经单酶切后把片段用重组酶重组到目标载体那
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
6楼2010-11-08 13:15:22
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