| 查看: 2134 | 回复: 11 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
superadeel新虫 (初入文坛)
|
[交流]
【求助/交流】土壤细菌多样性，引物F357GC R518 PCR老是出问题，求救！ 已有6人参与
|
|||
|
做土壤细菌多样性时，提的DNA用F357-GC和R518跑PCR ，能扩出来，但是条带很宽，很模糊，后续DGGE切胶，也是P出来很模糊，测序测不出来。 请问哪位大侠做过，经验分享一下，不胜感激。按理来说这个应该很容易做出来，不知道到我这里出了什么问题。 25ul体系：mix 12.5ul, 引物（10UM）各0.5uL，水10.5ul,模板1uL。（用Takara Ex tap 酶体系也做过） 程序：用touchdown，94度6分钟，94度1分钟，65-55度45秒（一循环降0.5度），72度45秒，20循环。后15个循环是94度1分钟，55度45秒，72度45秒。最后延伸10分钟。 [ Last edited by superadeel on 2010-9-28 at 16:58 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 土壤微生物 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有161人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR引物中M、S、R、H等字母是什么意思？
已经有7人回复
- DGGE胶浓度有问题，
已经有4人回复
- 请问古细菌的通用引物是什么？
已经有5人回复
- 土壤细菌DNA PCR问题
已经有6人回复
- 土壤总细菌16S PCR-条带不亮的问题
已经有19人回复
- 求助关于土壤细菌分离鉴定的知识，希望朋友帮忙解答
已经有8人回复
- ISSR-PCR的引物问题是只用1条？
已经有9人回复
- 细菌整个群落的DGGE引物
已经有4人回复
- 土壤真菌PCR-DGGE中真菌ITS区引物的选择
已经有10人回复
- 合成一段DNA的问题？引物，PCR
已经有13人回复
- 细菌引物 338F 518R 做DGGE之后 pcr
已经有9人回复
- 土壤真菌PCR，引物选择问题
已经有8人回复
- 求助细菌通用引物的区别
已经有4人回复
- 细菌16s pcr原液测序问题
已经有7人回复
- 土壤中含有农药，提取的土壤DNA进行PCR扩增，农药会抑制PCR反应吗
已经有5人回复
- 和touchdownPCR有关的
已经有5人回复
- 【求助/交流】细菌16SDNA的通用引物
已经有12人回复
- 【求助/交流】问下细菌固定的问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】土壤细菌TD-PCR二聚体如何消除[附图]
已经有3人回复
- 【求助/交流】土壤放线菌的多样性怎么做？
已经有7人回复
- 【求助/交流】细菌V3区PCR出现问题，引物为357和518，用于DGGE！
已经有8人回复
- 【求助/交流】关于降落pcr的问题！
已经有4人回复
- 【求助/交流】PCR 总是没P出来
已经有21人回复
superadeel
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 89
- 散金: 11
- 红花: 1
- 帖子: 46
- 在线: 14.6小时
- 虫号: 1088404
- 注册: 2010-09-03
- 专业: 环境微生物学
5楼2010-09-29 12:03:57
2楼2010-09-28 17:06:31
superadeel
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 89
- 散金: 11
- 红花: 1
- 帖子: 46
- 在线: 14.6小时
- 虫号: 1088404
- 注册: 2010-09-03
- 专业: 环境微生物学
3楼2010-09-28 20:20:43
xiadongliang
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 64 (初中生)
- 金币: 973.3
- 散金: 1299
- 红花: 15
- 帖子: 759
- 在线: 361.7小时
- 虫号: 433819
- 注册: 2007-08-18
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
4楼2010-09-29 11:10:30
