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xiamr

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR

我所用的pcr体系是50 的,文献上说模板加5 但我的DNA浓度达不到,是否能加到10 ,我试过一次这样能p出来东西。但会不会对体系有影响,或多下游实验有影响?急用!!!
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

请不要用体积来定义PCR体系
极限状态下,1个拷贝的模板都可以检测出来
克隆的话要求稍高一些
总之是要配合你的下游实验来确定PCR体系
加多少微升什么的,如果不确定浓度,光说体积毫无意义
8楼2010-09-09 12:54:59
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hulqi

金虫 (正式写手)

这个……一般我PCR25的体系,模板只加1啊
2楼2010-09-08 19:10:36
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cheo163

金虫 (小有名气)


amisking(金币+1):鼓励交流! 2010-09-08 19:58:09
模版多了也不见得你的dna浓度会上来啊~~
要不要换哈条件,小体系p然后合起来纯化
3楼2010-09-08 19:49:32
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

可以没有问题 50ul体系没有水么 把水少加一点就可以了
4楼2010-09-08 19:54:27
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