24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2164  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

nankou2008

铁杆木虫 (著名写手)

肥南瓜

[交流] 【求助/交流】PCR阴性对照总有扩增产物 都有哪些可能?

做荧光实时定量PCR  一个样品的NTC, 即无模板的阴性对照 总是有扩增曲线出来 请有经验的虫虫出来交流下 这种情况都有哪些可能?

PS: 刚开始以为是引物被污染了  或者操作过程 污染 ,后来重新定制引物  还是一样的结果 ,应该可以排除是污染的情况。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

湖深而静溪浅而鸣
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

足下客

木虫 (正式写手)

★ ★
lstt09nk(金币+2):鼓励交流,欢迎常来~~ 2010-08-14 09:57:43
nankou2008(金币+2):现在就是怀疑引物的问题了,可是想不通的是,引物怎么样才会出现这样的结果呢? 呵呵 谢谢! 2010-08-15 09:48:26
做PCR用的Mix很可能被污染了,要么就是你用的水不行,我都是用双蒸水,要非常干净的才行,阴性对照几乎没有P出条带来过,再就是你用的枪头了,或者是引物设计的有问题。如过污染都可以排除的话,那就是引物有问题了
5楼2010-08-14 08:48:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

mafang68

金虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-13 05:39:39
nankou2008(金币+2):谢谢 2010-08-13 08:22:49
还是污染问题,你只排除了引物,但是MIX,水等是否污染未知。你可从五方面一一排除,人员,物料来源,操作环境,仪器设备以及操作方法。如果实验室仅你自己出现此情况,那么需从自身找原因,其他像做实验时需带手套等也需注意。呵呵,我知道的就这么多了
木虫啦,哈哈
2楼2010-08-12 21:41:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nankou2008

铁杆木虫 (著名写手)

肥南瓜

引用回帖:
Originally posted by mafang68 at 2010-08-12 21:41:40:
还是污染问题,你只排除了引物,但是MIX,水等是否污染未知。你可从五方面一一排除,人员,物料来源,操作环境,仪器设备以及操作方法。如果实验室仅你自己出现此情况,那么需从自身找原因,其他像做实验时需带手 ...

我只有一个样品出现这样的问题了,都是我一个人操作的,其它样品是好的,所以人员,操作环境,仪器,方法的问题应该不是,物料来源,除了模板引物,其它的成分用在别的样品也都是好的,是不是可以排除物料的原因?并且多次重复都是如此…… 唉很郁闷 这个样品好难伺候啊 不知引物自身在没有模板的情况下,还有什么可能能扩出东西来,百思不得其解啊……
谢谢!
湖深而静溪浅而鸣
3楼2010-08-13 08:28:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mafang68

金虫 (著名写手)

发个你做的引物扩增图,先看看
木虫啦,哈哈
4楼2010-08-13 23:05:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 298求调剂 +8 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 10/500 2026-04-10 11:25 by 高维春
[考研] 机械还有还有名额吗?太难了 +5 笑笑袁 2026-04-10 5/250 2026-04-10 11:11 by zhouyuwinner
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550, 2026-04-10 6/300 2026-04-10 11:06 by 紫翼精灵
[考研] 化工调剂求导师收留!一志愿失利,踏实肯干,有植物提取科研经历 +17 yzyzx 2026-04-09 17/850 2026-04-10 10:29 by wp06
[考研] 已调剂 +18 柴郡猫_ 2026-04-09 19/950 2026-04-09 22:10 by 柴郡猫_
[考博] 材料方向考博,求推荐 +3 言语aaa 2026-04-05 4/200 2026-04-08 22:22 by nxgogo
[考研] 材料科学与工程320求调剂,080500 +12 黄瓜味薯片 2026-04-06 12/600 2026-04-08 16:26 by luoyongfeng
[考研] 283求调剂 +19 A child 2026-04-04 19/950 2026-04-08 14:26 by xingguangj
[考研] 275 求调剂 +8 Lei812514 2026-04-07 8/400 2026-04-08 12:46 by chemisry
[考研] 专硕085403,291分,有两篇专利,一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
[考研] 081700学硕,323分,一志愿中国海洋大学求调剂学校 +19 披星河 2026-04-04 19/950 2026-04-07 15:00 by 上岸快快
[考研] 327考研调剂推荐 +6 呜呜呜呜呢 2026-04-06 6/300 2026-04-06 21:39 by 啵啵啵0119
[考研] 专硕304找调剂,一线城市最好 +3 李lsl李 2026-04-05 3/150 2026-04-06 12:16 by ffffjjjj
[考研] 复试调剂 +5 asdasdassda 2026-04-05 5/250 2026-04-06 09:32 by dongzh2009
[考研] 生物与医药086000调剂一志愿西北农林320分 +3 美美女士 2026-04-03 3/150 2026-04-05 21:55 by 学员8dgXkO
[考研] 283求调剂 +5 baiiyu 2026-04-05 6/300 2026-04-05 20:35 by 啵啵啵0119
[考研] 327求调剂 +4 拾光任染 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:16 by 南航~万老师
[考研] 315求调剂 +5 &123456789 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:55 by nepu_uu
[考研] 358求调剂 +7 秋gk 2026-04-04 7/350 2026-04-05 13:29 by huangmoli
[考研] 387求调剂 +4 爱吃片豆土 2026-04-03 5/250 2026-04-04 08:10 by 岸上的一条鱼
信息提示
请填处理意见