应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 【求助/交流】PCR阴性对照总有扩增产物 都有哪些可能？
51/1返回列表
查看: 2463  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

nankou2008

铁杆木虫 (著名写手)

肥南瓜

[交流] 【求助/交流】PCR阴性对照总有扩增产物 都有哪些可能？

做荧光实时定量PCR  一个样品的NTC， 即无模板的阴性对照 总是有扩增曲线出来 请有经验的虫虫出来交流下 这种情况都有哪些可能？

PS： 刚开始以为是引物被污染了  或者操作过程 污染 ，后来重新定制引物  还是一样的结果 ，应该可以排除是污染的情况。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
湖深而静溪浅而鸣
1楼 2010-08-12 20:11:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

足下客

木虫 (正式写手)
★ ★
lstt09nk(金币+2):鼓励交流，欢迎常来~~ 2010-08-14 09:57:43
nankou2008(金币+2):现在就是怀疑引物的问题了，可是想不通的是，引物怎么样才会出现这样的结果呢？ 呵呵 谢谢！ 2010-08-15 09:48:26
做PCR用的Mix很可能被污染了，要么就是你用的水不行，我都是用双蒸水，要非常干净的才行，阴性对照几乎没有P出条带来过，再就是你用的枪头了，或者是引物设计的有问题。如过污染都可以排除的话，那就是引物有问题了
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-08-14 08:48:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

mafang68

金虫 (著名写手)
★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-13 05:39:39
nankou2008(金币+2):谢谢 2010-08-13 08:22:49
还是污染问题，你只排除了引物，但是MIX，水等是否污染未知。你可从五方面一一排除，人员，物料来源，操作环境，仪器设备以及操作方法。如果实验室仅你自己出现此情况，那么需从自身找原因，其他像做实验时需带手套等也需注意。呵呵，我知道的就这么多了
赞一下(1人) 回复此楼
木虫啦，哈哈
2楼2010-08-12 21:41:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nankou2008

铁杆木虫 (著名写手)

肥南瓜
引用回帖:
Originally posted by mafang68 at 2010-08-12 21:41:40:
还是污染问题，你只排除了引物，但是MIX，水等是否污染未知。你可从五方面一一排除，人员，物料来源，操作环境，仪器设备以及操作方法。如果实验室仅你自己出现此情况，那么需从自身找原因，其他像做实验时需带手 ...

我只有一个样品出现这样的问题了，都是我一个人操作的，其它样品是好的，所以人员，操作环境，仪器，方法的问题应该不是，物料来源，除了模板引物，其它的成分用在别的样品也都是好的，是不是可以排除物料的原因？并且多次重复都是如此…… 唉很郁闷 这个样品好难伺候啊 不知引物自身在没有模板的情况下，还有什么可能能扩出东西来，百思不得其解啊……
谢谢！
赞一下 回复此楼
湖深而静溪浅而鸣
3楼2010-08-13 08:28:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mafang68

金虫 (著名写手)
发个你做的引物扩增图，先看看
赞一下 回复此楼
木虫啦，哈哈
4楼2010-08-13 23:05:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 师弟论文见刊大半年才想起来申请专利，还能抢救一下吗？ +5 13108017953 2026-09-21 5/250 2026-09-27 16:46 by Leogzhya
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +3 zju2000 2026-09-26 3/150 2026-09-27 16:26 by lala1008
[硕博家园] 上海工程技术大学 激光智能制造课题组 2027级博士研究生招生 +5 oxidpl 2026-09-20 7/350 2026-09-27 10:43 by Equinoxhua
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:21 by 4IW0sJvtEqX8
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:15 by 4IW0sJvtEqX8
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ViqFlLSxHDGt 2026-09-26 3/150 2026-09-27 10:03 by 4IW0sJvtEqX8
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:44 by XgCC8uTcwILl
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:42 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 4/200 2026-09-27 06:39 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 GxESXJmptOtQ 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:32 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:08 by XgCC8uTcwILl
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 06:05 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:56 by XgCC8uTcwILl
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:50 by XgCC8uTcwILl
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 5/250 2026-09-27 05:44 by XgCC8uTcwILl
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 4/200 2026-09-27 05:44 by XgCC8uTcwILl
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 3/150 2026-09-27 05:44 by XgCC8uTcwILl
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 vQZoDrrm7mUF 2026-09-25 6/300 2026-09-27 05:42 by XgCC8uTcwILl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 PGTSwSC3F6nQ 2026-09-24 5/250 2026-09-25 11:19 by yhq9807
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 PGTSwSC3F6nQ 2026-09-24 7/350 2026-09-25 11:18 by yhq9807
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭