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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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雪空凌

银虫 (初入文坛)

[求助] 为什么我的pcr阴性对照总有很浅的条带呢,各位大侠帮忙指点下

我最近做的pcr阴性对照总是出现很浅的条带,比加了模板的出现的条带弱,不知为何,试剂已经全部换过了,环境也换过了,求指点,感激不尽
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
雪空凌(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-26 12:45:55
雪空凌: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-06-26 15:04:14
你是说阴性对照有模板链?那可能是阴性对照反应体系被模板链污染,可能是容器不干净,或者是微量移液器的吸杆和接头之间没有滤膜也没有消毒棉隔离,导致在PCR时的试剂气雾污染了微量移液器的吸杆(包括含模板的试剂),因此在阴性对照反应体系被模板链污染。
2楼2013-06-25 22:37:51
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武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-26 12:46:03
水呢?是否 酶,dntp,buffer有污染?点样的时候是否有溢出
3楼2013-06-26 00:09:15
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
雪空凌(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-26 12:46:11
你可以回收测序看看,可能是大肠的。有些批次的dna聚合酶在纯化时会有大肠的dna污染,换另一批次产品试试。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2013-06-26 08:13:08
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Catherinewh

金虫 (小有名气)

有没有可能是你的primer被模板contaminate了?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2013-06-27 21:08:12
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浮帅古

铜虫 (小有名气)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-07-13 13:23:54
配体系时先加阴性对照,后加模板,操作中小心气溶胶污染,祝楼主好运
努力爱!
6楼2013-07-13 00:46:58
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oliver501

新虫 (初入文坛)

可能是引物形成了二聚体或多聚体
7楼2013-07-23 22:37:03
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