应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问各位大侠，我的这个PCR到底是什么原因，请大家给我分析一下呗？
111/1返回列表
查看: 1633  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zishilanxuan

金虫 (小有名气)

[交流] 请问各位大侠，我的这个PCR到底是什么原因，请大家给我分析一下呗？

请问各位大侠，我的这个PCR到底是什么原因，请大家给我分析一下呗？第一个是2000的Mark,后面的六个是不同温度的，我的目的基因是1911，请问各位大侠，我的这个PCR能用么？哪个带应该是呢？补充一点，我用的是高保真的酶！
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

jqq1985

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-06-21 13:46:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

太极拳

木虫 (小有名气)
★
zishilanxuan(金币+1): 谢谢参与
不同的温度跑出几乎一样的带型，个人认为引物设计的不好，而且目的条带很不明显，还没有下面的杂带亮，建议重新设计引物！
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-21 14:27:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)
★
zishilanxuan(金币+1): 谢谢参与
第四个上面的条带应该就是了，可是，看你这胶感觉这也太惨了，不知道你的温度梯度是多少的？
赞一下 回复此楼
3楼2012-06-21 15:26:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zkyysmzl

新虫 (正式写手)
★
zishilanxuan(金币+1): 谢谢参与
这个，则么分析啊。咋我什么都没看出来啊。
赞一下 回复此楼
4楼2012-06-21 18:42:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Constig

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-21 19:41:33
杂带太多了，不知道温度梯度有没有在60以上的，我们实验室一般先用60跑一次，因为特异性比较高，一般条带就比较单一，如果没有条带再跑一次梯度。看你的胶图，在1900bp左右没有明显条带，如果温度没有问题，肯定是引物特异性不高，或者简并引物过多。希望有所帮助
赞一下 回复此楼
5楼2012-06-21 19:23:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

504775490

金虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主的杂带很多，第四个样最亮的那条带可能是你的目的条带，建议重新设计引物再做一次，这个引物的特异性不高！个人意见，仅供参考！
赞一下 回复此楼
6楼2012-06-21 23:16:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taigongzaici

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看实验目的主要是，要是回收的话，直接切胶纯化就可以了，高保真酶扩增效率就是不如rTaq,为了提高特异性，可适当提高退火温度试试看
赞一下 回复此楼
7楼2012-06-22 09:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jlc0225

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
把目的带切胶回收后作为PCR的模板重新做一次PCR
赞一下 回复此楼
8楼2012-06-22 11:44:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biochemislxr

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
PCR结果出来怎么会这么杂？你的模板是什么啊？cDNA？如果是cDNA，楼主设计的引物会不会是与基因中的重复序列匹配的
赞一下 回复此楼
9楼2012-06-27 16:53:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lyweichen

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
据我目测，没有1911的条带
赞一下 回复此楼
10楼2012-06-27 19:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助，很热心哦 2012-06-28 15:53:31
楼主用的是DL2000的marker（2000,1000,750，500,200,100？）吧？个人以为marker旁边第一道从上往下第二条应该就是目标条带了，不知道你上样多少PCR产物。觉得这个浓度还挺高的。就是杂带非常多，应该引物设计的不好。但是可以割胶回收的。如果执着于P的单一一些，这个引物似乎不太好。可以试着在第一道的退火温度基础上2度2度往上加，非特异性条带应该会少点，但是你的目标产物可能也会越来越少，最终是什么样子的结果不太清楚。
赞一下 回复此楼
11楼2012-06-28 13:30:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zishilanxuan 的主题更新
111/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料，材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 08工学调剂 +7 用户573181 2026-03-20 12/600 2026-03-24 11:17 by 用户573181
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂 +12 吃吃吃才有意义 2026-03-19 13/650 2026-03-24 10:06 by NCUT_Yu
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +6 holy J 2026-03-21 6/300 2026-03-24 09:51 by hengsmith
[考研] 07化学280分求调剂 +4 722865 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:01 by chixmc
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 材料专业求调剂 +11 hanamiko 2026-03-18 11/550 2026-03-23 23:12 by peike
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123！
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 289求调剂 +7 怀瑾握瑜l 2026-03-20 7/350 2026-03-22 15:57 by ColorlessPI
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 二本跨考郑大材料306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:29 by JourneyLucky
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭