应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问各位大侠，我的这个PCR到底是什么原因，请大家给我分析一下呗？
111/1返回列表
查看: 1632  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zishilanxuan

金虫 (小有名气)

[交流] 请问各位大侠，我的这个PCR到底是什么原因，请大家给我分析一下呗？

请问各位大侠，我的这个PCR到底是什么原因，请大家给我分析一下呗？第一个是2000的Mark,后面的六个是不同温度的，我的目的基因是1911，请问各位大侠，我的这个PCR能用么？哪个带应该是呢？补充一点，我用的是高保真的酶！
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

jqq1985

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-06-21 13:46:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

太极拳

木虫 (小有名气)
★
zishilanxuan(金币+1): 谢谢参与
不同的温度跑出几乎一样的带型，个人认为引物设计的不好，而且目的条带很不明显，还没有下面的杂带亮，建议重新设计引物！
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-21 14:27:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)
★
zishilanxuan(金币+1): 谢谢参与
第四个上面的条带应该就是了，可是，看你这胶感觉这也太惨了，不知道你的温度梯度是多少的？
赞一下 回复此楼
3楼2012-06-21 15:26:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zkyysmzl

新虫 (正式写手)
★
zishilanxuan(金币+1): 谢谢参与
这个，则么分析啊。咋我什么都没看出来啊。
赞一下 回复此楼
4楼2012-06-21 18:42:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Constig

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-21 19:41:33
杂带太多了，不知道温度梯度有没有在60以上的，我们实验室一般先用60跑一次，因为特异性比较高，一般条带就比较单一，如果没有条带再跑一次梯度。看你的胶图，在1900bp左右没有明显条带，如果温度没有问题，肯定是引物特异性不高，或者简并引物过多。希望有所帮助
赞一下 回复此楼
5楼2012-06-21 19:23:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

504775490

金虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主的杂带很多，第四个样最亮的那条带可能是你的目的条带，建议重新设计引物再做一次，这个引物的特异性不高！个人意见，仅供参考！
赞一下 回复此楼
6楼2012-06-21 23:16:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taigongzaici

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看实验目的主要是，要是回收的话，直接切胶纯化就可以了，高保真酶扩增效率就是不如rTaq,为了提高特异性，可适当提高退火温度试试看
赞一下 回复此楼
7楼2012-06-22 09:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jlc0225

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
把目的带切胶回收后作为PCR的模板重新做一次PCR
赞一下 回复此楼
8楼2012-06-22 11:44:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biochemislxr

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
PCR结果出来怎么会这么杂？你的模板是什么啊？cDNA？如果是cDNA，楼主设计的引物会不会是与基因中的重复序列匹配的
赞一下 回复此楼
9楼2012-06-27 16:53:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lyweichen

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
据我目测，没有1911的条带
赞一下 回复此楼
10楼2012-06-27 19:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助，很热心哦 2012-06-28 15:53:31
楼主用的是DL2000的marker（2000,1000,750，500,200,100？）吧？个人以为marker旁边第一道从上往下第二条应该就是目标条带了，不知道你上样多少PCR产物。觉得这个浓度还挺高的。就是杂带非常多，应该引物设计的不好。但是可以割胶回收的。如果执着于P的单一一些，这个引物似乎不太好。可以试着在第一道的退火温度基础上2度2度往上加，非特异性条带应该会少点，但是你的目标产物可能也会越来越少，最终是什么样子的结果不太清楚。
赞一下 回复此楼
11楼2012-06-28 13:30:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zishilanxuan 的主题更新
111/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程（085601） +3 WW.' 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:18 by 枫翼ljj
[考研] 306求调剂 +9 chuanzhu川烛 2026-03-18 9/450 2026-03-23 13:17 by luoyongfeng
[考研] 石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 280求调剂 +11 咕噜晓晓 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭