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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问各位大侠，我的这个PCR到底是什么原因，请大家给我分析一下呗？
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zishilanxuan

金虫 (小有名气)

[交流] 请问各位大侠，我的这个PCR到底是什么原因，请大家给我分析一下呗？

请问各位大侠，我的这个PCR到底是什么原因，请大家给我分析一下呗？第一个是2000的Mark,后面的六个是不同温度的，我的目的基因是1911，请问各位大侠，我的这个PCR能用么？哪个带应该是呢？补充一点，我用的是高保真的酶！
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1楼 2012-06-21 13:46:36
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dshlove

木虫 (正式写手)
★
zishilanxuan(金币+1): 谢谢参与
第四个上面的条带应该就是了，可是，看你这胶感觉这也太惨了，不知道你的温度梯度是多少的？
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3楼2012-06-21 15:26:31
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太极拳

木虫 (小有名气)
★
zishilanxuan(金币+1): 谢谢参与
不同的温度跑出几乎一样的带型，个人认为引物设计的不好，而且目的条带很不明显，还没有下面的杂带亮，建议重新设计引物！
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2楼2012-06-21 14:27:52
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zkyysmzl

新虫 (正式写手)
★
zishilanxuan(金币+1): 谢谢参与
这个，则么分析啊。咋我什么都没看出来啊。
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4楼2012-06-21 18:42:23
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Constig

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-21 19:41:33
杂带太多了，不知道温度梯度有没有在60以上的，我们实验室一般先用60跑一次，因为特异性比较高，一般条带就比较单一，如果没有条带再跑一次梯度。看你的胶图，在1900bp左右没有明显条带，如果温度没有问题，肯定是引物特异性不高，或者简并引物过多。希望有所帮助
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5楼2012-06-21 19:23:42
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