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zishilanxuan

金虫 (小有名气)


[交流] 请问各位大侠,我的这个PCR到底是什么原因,请大家给我分析一下呗?

请问各位大侠,我的这个PCR到底是什么原因,请大家给我分析一下呗?第一个是2000的Mark,后面的六个是不同温度的,我的目的基因是1911,请问各位大侠,我的这个PCR能用么?哪个带应该是呢?补充一点,我用的是高保真的酶!
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dshlove

木虫 (正式写手)



zishilanxuan(金币+1): 谢谢参与
第四个上面的条带应该就是了,可是,看你这胶感觉这也太惨了,不知道你的温度梯度是多少的?
3楼2012-06-21 15:26:31
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太极拳

木虫 (小有名气)



zishilanxuan(金币+1): 谢谢参与
不同的温度跑出几乎一样的带型,个人认为引物设计的不好,而且目的条带很不明显,还没有下面的杂带亮,建议重新设计引物!
2楼2012-06-21 14:27:52
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zkyysmzl

新虫 (正式写手)



zishilanxuan(金币+1): 谢谢参与
这个,则么分析啊。咋我什么都没看出来啊。
4楼2012-06-21 18:42:23
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Constig

银虫 (小有名气)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-21 19:41:33
杂带太多了,不知道温度梯度有没有在60以上的,我们实验室一般先用60跑一次,因为特异性比较高,一般条带就比较单一,如果没有条带再跑一次梯度。看你的胶图,在1900bp左右没有明显条带,如果温度没有问题,肯定是引物特异性不高,或者简并引物过多。希望有所帮助
5楼2012-06-21 19:23:42
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