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zishilanxuan

金虫 (小有名气)

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[交流] 请问各位大侠，我的这个PCR到底是什么原因，请大家给我分析一下呗？

请问各位大侠，我的这个PCR到底是什么原因，请大家给我分析一下呗？第一个是2000的Mark,后面的六个是不同温度的，我的目的基因是1911，请问各位大侠，我的这个PCR能用么？哪个带应该是呢？补充一点，我用的是高保真的酶！

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jqq1985

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1楼 2012-06-21 13:46:36

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jqq1985

银虫 (正式写手)

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

送鲜花一朵
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助，很热心哦 2012-06-28 15:53:31

楼主用的是DL2000的marker（2000,1000,750，500,200,100？）吧？个人以为marker旁边第一道从上往下第二条应该就是目标条带了，不知道你上样多少PCR产物。觉得这个浓度还挺高的。就是杂带非常多，应该引物设计的不好。但是可以割胶回收的。如果执着于P的单一一些，这个引物似乎不太好。可以试着在第一道的退火温度基础上2度2度往上加，非特异性条带应该会少点，但是你的目标产物可能也会越来越少，最终是什么样子的结果不太清楚。