应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 【求助/交流】PCR阴性对照总有扩增产物 都有哪些可能？
71/1返回列表
查看: 2103  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

nankou2008

铁杆木虫 (著名写手)

肥南瓜

[交流] 【求助/交流】PCR阴性对照总有扩增产物 都有哪些可能？

做荧光实时定量PCR  一个样品的NTC， 即无模板的阴性对照 总是有扩增曲线出来 请有经验的虫虫出来交流下 这种情况都有哪些可能？

PS： 刚开始以为是引物被污染了  或者操作过程 污染 ，后来重新定制引物  还是一样的结果 ，应该可以排除是污染的情况。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
湖深而静溪浅而鸣
1楼 2010-08-12 20:11:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mafang68

金虫 (著名写手)
★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-13 05:39:39
nankou2008(金币+2):谢谢 2010-08-13 08:22:49
还是污染问题，你只排除了引物，但是MIX，水等是否污染未知。你可从五方面一一排除，人员，物料来源，操作环境，仪器设备以及操作方法。如果实验室仅你自己出现此情况，那么需从自身找原因，其他像做实验时需带手套等也需注意。呵呵，我知道的就这么多了
赞一下(1人) 回复此楼
木虫啦，哈哈
2楼2010-08-12 21:41:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nankou2008

铁杆木虫 (著名写手)

肥南瓜
引用回帖:
Originally posted by mafang68 at 2010-08-12 21:41:40:
还是污染问题，你只排除了引物，但是MIX，水等是否污染未知。你可从五方面一一排除，人员，物料来源，操作环境，仪器设备以及操作方法。如果实验室仅你自己出现此情况，那么需从自身找原因，其他像做实验时需带手 ...

我只有一个样品出现这样的问题了，都是我一个人操作的，其它样品是好的，所以人员，操作环境，仪器，方法的问题应该不是，物料来源，除了模板引物，其它的成分用在别的样品也都是好的，是不是可以排除物料的原因？并且多次重复都是如此…… 唉很郁闷 这个样品好难伺候啊 不知引物自身在没有模板的情况下，还有什么可能能扩出东西来，百思不得其解啊……
谢谢！
赞一下 回复此楼
湖深而静溪浅而鸣
3楼2010-08-13 08:28:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mafang68

金虫 (著名写手)
发个你做的引物扩增图，先看看
赞一下 回复此楼
木虫啦，哈哈
4楼2010-08-13 23:05:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

足下客

木虫 (正式写手)
★ ★
lstt09nk(金币+2):鼓励交流，欢迎常来~~ 2010-08-14 09:57:43
nankou2008(金币+2):现在就是怀疑引物的问题了，可是想不通的是，引物怎么样才会出现这样的结果呢？ 呵呵 谢谢！ 2010-08-15 09:48:26
做PCR用的Mix很可能被污染了，要么就是你用的水不行，我都是用双蒸水，要非常干净的才行，阴性对照几乎没有P出条带来过，再就是你用的枪头了，或者是引物设计的有问题。如过污染都可以排除的话，那就是引物有问题了
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-08-14 08:48:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑妞儿

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 足下客 at 2010-08-14 08:48:44
做PCR用的Mix很可能被污染了，要么就是你用的水不行，我都是用双蒸水，要非常干净的才行，阴性对照几乎没有P出条带来过，再就是你用的枪头了，或者是引物设计的有问题。如过污染都可以排除的话，那就是引物有问题了

如果用的是试剂盒，阴性对照有扩增曲线是什么原因呢？
赞一下 回复此楼
6楼2014-02-13 16:18:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by nankou2008 at 2010-08-13 08:28:11
我只有一个样品出现这样的问题了，都是我一个人操作的，其它样品是好的，所以人员，操作环境，仪器，方法的问题应该不是，物料来源，除了模板引物，其它的成分用在别的样品也都是好的，是不是可以排除物料的原因 ...

阳性样品的气溶胶污染阴性样品
赞一下 回复此楼
7楼2014-02-14 11:02:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nankou2008 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 272求调剂 +3 材紫有化 2026-02-28 3/150 2026-02-28 22:52 by ms629
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 290求调剂 +5 材料专硕调剂； 2026-02-28 6/300 2026-02-28 21:40 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料学调剂 +5 提神豆沙包 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:34 by gaoxiaoniuma
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 311求调剂 +8 南迦720 2026-02-28 8/400 2026-02-28 21:30 by gaoxiaoniuma
[考研] 求调剂 +4 repeatt?t 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:16 by gaoxiaoniuma
[考研] 高分子化学与物理调剂 +4 好好好1233 2026-02-28 7/350 2026-02-28 20:42 by 好好好1233
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 9/450 2026-02-28 12:32 by seaskyy
[考研] 298求调剂 +4 axyz3 2026-02-28 4/200 2026-02-28 11:21 by wang_dand
[基金申请] 面上可以超过30页吧？ +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭