应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】在真菌基因组中PCR基因，难吗？
51/1返回列表
查看: 2323  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

ap

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】在真菌基因组中PCR基因，难吗？ 已有10人参与

我提取黑曲霉基因组，PCR三段片段，分别为6kb，6kb，1.6kb。结果都是杂带，没有目的带。
而我以大肠基因组为模板PCR一段基因，却非常顺利。
是黑曲霉PCR引物我设计的不好？还是真菌基因组为模板的PCR本身就不好做？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-07-30 11:28:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
首先考虑模板问题，个人认为一般是模板问题，引物一般没什么太大问题，建议你用降落PCR来做。。。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-07-30 15:21:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

qingxiong

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是扩增的片段太长了呢？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-07-30 12:00:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingxiong

木虫 (正式写手)
★ ★
看天(金币+2):鼓励交流 2010-07-30 12:20:21
又或者是真菌模板质量不好呢，扩不出来有很多原因的，扩增体系，扩增条件优化了没有呢？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-07-30 12:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ap

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by qingxiong at 2010-07-30 12:01:36:
又或者是真菌模板质量不好呢，扩不出来有很多原因的，扩增体系，扩增条件优化了没有呢？

基因组好像提得不好，量很少。做过退火温度梯度和模板浓度梯度，都没有目的带。杂带是在退火温度低、模板浓度大的时候比较亮。
觉得主要还是引物的问题？关键是目的带就没有，杂带还挺亮的。很郁闷。
赞一下 回复此楼
4楼2010-07-30 12:37:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭