| 查看: 3684 | 回复: 18 | ||||
| 本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看 | ||||
[求助]
快崩溃了，提个DNA 有这么难吗？
|
||||
 各位师哥师姐师妹师弟，你们是否可以帮助小女子一下，我用天根的试剂盒提取真菌基因组DNA，一步步都是按照步骤来的，可是最后跑电泳却什么也没有 ，第一步我听从上一届师兄的建议，利用石英砂研磨的菌丝体，研磨的也很细致。但是最后结果真的让我快崩溃了。做分子的童鞋真的伤不起啊！ 都做了半个月了，一遍遍的提取，我实在是对自己失望透顶了。关键是找不到原因。这就像是一个灵异事件，真的太鬼魅了！ 感谢大家，小女子这厢有礼啦~  |
回复此楼» 猜你喜欢
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有18人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有12人回复
-
有没有仍没收到信息的
已经有3人回复
-
导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！
已经有8人回复
-
基金不中，共勉
已经有11人回复
-
麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上）
已经有9人回复
-
2026年叶企孙基金
已经有6人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有13人回复
-
基金系统什么内容也没有
已经有9人回复
-
怎么查啊
已经有6人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 微量紫外测DNA OD260\OD280的比值
已经有8人回复
- 【课件】个人提升——如何制订合理的年计划
已经有141人回复
- materials letter审稿都快四个月了正不正常，这么个情况啊
已经有16人回复
- 【资料】DNA提取、检测、PCR、电泳SSR
已经有262人回复
- 请教下大家 菊米黄酮提取时怎么除叶绿素啊
已经有10人回复
- 请教RNA提取高手：反转录PCR（RT-PCR)中DNA的去除
已经有18人回复
- 合成一段DNA的问题？引物，PCR
已经有13人回复
- 寻找带有目的基因的DNA片段
已经有9人回复
- 请教：叶绿体、线粒体、细胞核DNA的相互关系
已经有7人回复
- 快崩溃了！ 如何预测单链DNA的二级结构？
已经有10人回复
- 分子信标（茎环DNA）的稳定性
已经有5人回复
- 提基因组DNA电泳有三条带是怎么回事啊?
已经有6人回复
- 【求助/交流】怎么做都提不出DNA，请高手帮一下忙喽！！！！
已经有52人回复
- 【求助/交流】提取DNA总提不出来
已经有23人回复
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - MicEPI: 114
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19823
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6621
- 在线: 2794小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
silicare: 金币+5, MicEPI+1, 应助指数+1, 的确是个问题 2014-07-21 17:50:31
silicare: 金币+5, MicEPI+1, 应助指数+1, 的确是个问题 2014-07-21 17:50:31
|
小木虫有个很蠢的缺点，太久远的搜索不显示。 5）DNA抽提液的配置 表 2-5 DNA抽提液的配置 Table 2-5 The component of DNA distilling buffer 成分 浓度 NaCl 200mmol/L EDTA-Na2 4mmol/L SDS 2% Tris-HCl(pH=8.0) 100mmol/L 2.2.5.2.1真菌总DNA的提取 （1）接种菌株至液体培养基中，28℃，180rpm振荡培养3天； （2）用灭菌纱布过滤，并压干菌体； （3）将菌丝体倒入研钵（灭菌并预冷），迅速倒入液氮，研磨至粉末状； （4）将粉末移至1.5mL的EP管中，加入600µL真菌提取液； （5）加等体积苯酚/氯仿，轻轻倒转混合，10000rpm离心10min； （6）取500µL上清液移入新的1.5mlLEP管，重复步骤（5）； （7）取上清液，加入两倍体积无水乙醇，-20℃放置30min； （8）10000rpm 离心10min，沉淀物用75%乙醇洗2次后真空干燥； （9）以20µL 1×TE 溶解沉淀物； （10）电泳检测总DNA的浓度。  图片1.jpg |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
暖暖ai18楼2014-07-21 13:03:46
maidmocha
铁杆木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 6475.6
- 帖子: 56
- 在线: 56.1小时
- 虫号: 1366066
- 注册: 2011-08-11
- 专业: 微生物生理与生物化学
13楼2011-10-15 23:39:00
2楼2011-09-15 13:28:37
3楼2011-09-15 14:06:20
4楼2011-09-15 15:30:22
5楼2011-09-15 16:11:30
6楼2011-09-15 20:35:07
7楼2011-09-15 20:36:01
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - MicEPI: 114
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19823
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6621
- 在线: 2794小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
8楼2011-09-15 22:47:34
9楼2011-09-16 08:36:13
weekend883
金虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1117
- 散金: 100
- 帖子: 130
- 在线: 78.1小时
- 虫号: 493325
- 注册: 2008-01-10
- 专业: 微生物遗传育种学
10楼2011-09-16 14:55:38
投票:
30