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寻找带有目的基因的DNA片段
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laokuang1988
铜虫
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[交流]
寻找带有目的基因的DNA片段
已有6人参与
各位,是不是可以用PCR方法代替用探针的方法来寻找带有目的基因的DNA片段?
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1楼
2011-11-05 13:04:27
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叼蛮bi
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2楼
2011-11-05 13:31:22
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陈青chenqing
铜虫
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amisking(金币+1): 鼓励发帖交流! 2011-11-05 15:07:27
你是想知道该基因在基因组中的位置吗?如果这样的话 可以用RACE的方法呀
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自己的未来自己创造!
3楼
2011-11-05 13:53:45
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wcwluwei
禁虫
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4楼
2011-11-05 14:39:13
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wanhscn
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专业: 植物遗传学
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探针与引物还是有区别的!
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真相是最大的奢侈品
5楼
2011-11-05 17:03:26
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laokuang1988
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专业: 微生物生理与生物化学
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wanhscn(金币+2): 鼓励交流! 2011-11-06 08:16:49
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3楼
:
Originally posted by
陈青chenqing
at 2011-11-05 13:53:45:
你是想知道该基因在基因组中的位置吗?如果这样的话 可以用RACE的方法呀
我是想找到片段,然后再进行反向PCR扩基因两端序列。因为要扩增一个基因,但是没有找到该菌株这个基因的序列,所以比对了保守区,根据保守区设计引物,不知道得到PCR产物后下一步该怎么做,能不能提一点意见
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6楼
2011-11-05 22:11:52
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lwq652
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genome walking
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一念错,便觉百行皆非,防之当如渡海浮囊,勿容一针之罅漏
7楼
2011-11-05 22:51:42
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laokuang1988
铜虫
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专业: 微生物生理与生物化学
各位,还有什么好的建议吗
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8楼
2011-11-06 10:33:33
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西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good! 2011-11-07 18:51:46
得到PCR产物接着测序,根据测序结果搜索到最相似序列,如果相似度很高,参考该序列,如果包含完整基因,就设计引物把基因PCR出来。如果相似度不高或者基因不完整,就麻烦了。筛DNA/cDNA文库,或设计猜测引物做Tail-PCR,RACE,genome walking等都可以吧。
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为什么
9楼
2011-11-07 12:57:55
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laokuang1988
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引用回帖:
9楼
:
Originally posted by
547star
at 2011-11-07 12:57:55:
得到PCR产物接着测序,根据测序结果搜索到最相似序列,如果相似度很高,参考该序列,如果包含完整基因,就设计引物把基因PCR出来。如果相似度不高或者基因不完整,就麻烦了。筛DNA/cDNA文库,或设计猜测引物做Tai ...
谢谢诶。
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10楼
2011-11-07 16:38:56
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