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laokuang1988

铜虫 (小有名气)

[交流] 寻找带有目的基因的DNA片段 已有6人参与

各位,是不是可以用PCR方法代替用探针的方法来寻找带有目的基因的DNA片段?
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【分子生物】EPI帖 核酸与基因生物学

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2楼2011-11-05 13:31:22
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陈青chenqing

铜虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流! 2011-11-05 15:07:27
你是想知道该基因在基因组中的位置吗?如果这样的话  可以用RACE的方法呀
自己的未来自己创造!
3楼2011-11-05 13:53:45
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wcwluwei

禁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

4楼2011-11-05 14:39:13
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
探针与引物还是有区别的!
真相是最大的奢侈品
5楼2011-11-05 17:03:26
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流! 2011-11-06 08:16:49
引用回帖:
3楼: Originally posted by 陈青chenqing at 2011-11-05 13:53:45:
你是想知道该基因在基因组中的位置吗?如果这样的话  可以用RACE的方法呀

我是想找到片段,然后再进行反向PCR扩基因两端序列。因为要扩增一个基因,但是没有找到该菌株这个基因的序列,所以比对了保守区,根据保守区设计引物,不知道得到PCR产物后下一步该怎么做,能不能提一点意见
6楼2011-11-05 22:11:52
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lwq652

木虫 (正式写手)

genome walking
一念错,便觉百行皆非,防之当如渡海浮囊,勿容一针之罅漏
7楼2011-11-05 22:51:42
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)

各位,还有什么好的建议吗
8楼2011-11-06 10:33:33
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547star

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good! 2011-11-07 18:51:46
得到PCR产物接着测序,根据测序结果搜索到最相似序列,如果相似度很高,参考该序列,如果包含完整基因,就设计引物把基因PCR出来。如果相似度不高或者基因不完整,就麻烦了。筛DNA/cDNA文库,或设计猜测引物做Tail-PCR,RACE,genome walking等都可以吧。
为什么
9楼2011-11-07 12:57:55
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 547star at 2011-11-07 12:57:55:
得到PCR产物接着测序,根据测序结果搜索到最相似序列,如果相似度很高,参考该序列,如果包含完整基因,就设计引物把基因PCR出来。如果相似度不高或者基因不完整,就麻烦了。筛DNA/cDNA文库,或设计猜测引物做Tai ...

谢谢诶。
10楼2011-11-07 16:38:56
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