【答案】应助回帖

11楼2011-10-10 00:27:59

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

laokuang1988

铜虫 (小有名气)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 504.3
帖子: 173
在线: 54.3小时
虫号: 1299968
注册: 2011-05-19
性别: MM
专业: 微生物生理与生物化学

★ ★
zhang8826857(金币+2): 鼓励积极回帖交流^_^鼓励新虫 2011-10-16 10:13:13

我前几天刚提了真菌的，是用手提的，加了石英砂，在漩涡震荡仪上振荡充分，提出来了。

12楼2011-10-15 18:40:21

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

maidmocha

铁杆木虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 6475.6
帖子: 56
在线: 56.1小时
虫号: 1366066
注册: 2011-08-11
专业: 微生物生理与生物化学

★
zhang8826857(金币+1): 鼓励积极回帖交流^_^ 2011-10-16 10:13:21

建议使用CTAB & 液氮研磨法，得率和纯度都不错。注意一下低温的保持。其他的方法都很成熟。
个人认为，DNA与RNA的提取完全不需要试剂盒什么的。

赞一下(2人)

13楼2011-10-15 23:39:00

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

doublehelix

木虫 (著名写手)

MicEPI: 1
应助: 16 (小学生)
金币: 4035.7
散金: 666
红花: 6
帖子: 1201
在线: 167小时
虫号: 79445
注册: 2005-07-10
专业: 生物大分子结构与功能

★
zhang8826857(金币+1): 鼓励积极回帖 2011-10-16 15:03:21

真菌是挺难提的，我以前用氯化苄法，DNA完全可满足分子生物学的需要

14楼2011-10-16 14:08:36

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 12.5
帖子: 8
在线: 1.7小时
虫号: 0
注册: 2011-06-16
性别: MM
专业: 教育统计学

本帖仅楼主可见

15楼2011-10-18 14:23:27

已阅申请MicEPI 回复此楼编辑查看我的主页

julin1002

新虫 (初入文坛)

应助: 10 (幼儿园)
金币: 557.5
红花: 7
帖子: 30
在线: 5.4小时
虫号: 1810801
注册: 2012-05-11
专业: 生物大分子结构与功能

我们在跑电泳时用的是TAE缓冲液，用EB染色

16楼2012-05-11 19:32:29

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

暖暖ai

银虫 (著名写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 1652.6
散金: 359
红花: 18
沙发: 1
帖子: 1140
在线: 129.5小时
虫号: 1302203
注册: 2011-05-21
专业: 微生物资源与分类学

引用回帖:

8楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-09-15 22:47:34
楼主极少上论坛，找一下我获得EPI 的回帖吧，就全明白了，我在这里就不说方法了，我不想要重复的EPI。

我没找到你说的那个贴，能不能给我发一下吖

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

17楼2014-07-21 08:39:08

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

专家经验: +248
MicEPI: 114
应助: 257 (大学生)
贵宾: 0.272
金币: 19450.9
散金: 1704
红花: 121
帖子: 6585
在线: 2775.9小时
虫号: 856414
注册: 2009-09-25
性别: GG
专业: 环境微生物学
管辖: 微生物

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
silicare: 金币+5, MicEPI+1, 应助指数+1, 的确是个问题 2014-07-21 17:50:31

引用回帖:

17楼: Originally posted by 暖暖ai at 2014-07-21 08:39:08
我没找到你说的那个贴，能不能给我发一下吖
...

小木虫有个很蠢的缺点，太久远的搜索不显示。

5）DNA抽提液的配置
表 2-5 DNA抽提液的配置
Table 2-5 The component of DNA distilling buffer
成分浓度
NaCl 200mmol/L
EDTA-Na2 4mmol/L
SDS 2%
Tris-HCl(pH=8.0) 100mmol/L

2.2.5.2.1真菌总DNA的提取
（1）接种菌株至液体培养基中，28℃，180rpm振荡培养3天；
（2）用灭菌纱布过滤，并压干菌体；
（3）将菌丝体倒入研钵（灭菌并预冷），迅速倒入液氮，研磨至粉末状；
（4）将粉末移至1.5mL的EP管中，加入600µL真菌提取液；
（5）加等体积苯酚/氯仿，轻轻倒转混合，10000rpm离心10min；
（6）取500µL上清液移入新的1.5mlLEP管，重复步骤（5）；
（7）取上清液，加入两倍体积无水乙醇，-20℃放置30min；
（8）10000rpm 离心10min，沉淀物用75%乙醇洗2次后真空干燥；
（9）以20µL 1×TE 溶解沉淀物；
（10）电泳检测总DNA的浓度。

图片1.jpg

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

暖暖ai

流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。

18楼2014-07-21 13:03:46

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

暖暖ai

银虫 (著名写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 1652.6
散金: 359
红花: 18
沙发: 1
帖子: 1140
在线: 129.5小时
虫号: 1302203
注册: 2011-05-21
专业: 微生物资源与分类学

送红花一朵

引用回帖:

18楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2014-07-21 13:03:46
小木虫有个很蠢的缺点，太久远的搜索不显示。

5）DNA抽提液的配置
表 2-5 DNA抽提液的配置
Table 2-5 The component of DNA distilling buffer
成分浓度
NaCl 200mmol/L
EDTA-Na2 4mmol/L
SDS 2%
Tris ...

谢谢你。有不懂的还会麻烦你的！