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陈思容

铜虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】PCR产物直接测序，不出峰，啥原因？已有7人参与

如题，最近几个序列测序，PFU扩的，跑胶条带挺亮，结果测序公司说不出峰，要么就是杂乱无章，技术人员也说不出来所以然，急死人了

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1楼2010-07-20 13:40:32

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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！

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★ ★
陈思容(金币+5): 2010-07-20 16:50:50
1949stone(金币+2):正解 2010-07-20 16:52:19

我经常遇到这样的问题，现在基本上也没有什么好的解决办法，只是不断的重复，因为我要测序的样品太多，不可能全部做克隆，我一般是纯化后再送去测序，还会挑一两个纯化的样品来检测一下，看是否纯化成功，有些样品送去N次了还测不出来，就克隆，有时候我也会对别人测序公司发下牢骚，威胁说再测不出来再也不去他们那边测了，有可能是别人测序的不舍得加成本，加的试剂太少了……

总结，纯化后再送样;对测序公司施加压力;重复PCR几次再送样;实在做不出来的克隆……