应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR产物直接测序，不出峰，啥原因？
51/1返回列表
查看: 1918  |  回复: 11
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR产物直接测序，不出峰，啥原因？已有7人参与

如题，最近几个序列测序，PFU扩的，跑胶条带挺亮，结果测序公司说不出峰，要么就是杂乱无章，技术人员也说不出来所以然，急死人了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2010-07-20 13:40:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

andyduan

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
3楼2010-07-20 14:44:13
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

liouwzh

木虫 (正式写手)
★
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-20 16:51:40
实在不行就做TA克隆之后再测序。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-07-20 14:32:15
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoru2010

★
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-20 16:51:50
引用回帖:
Originally posted by 陈思容 at 2010-07-20 13:40:32:
如题，最近几个序列测序，PFU扩的，跑胶条带挺亮，结果测序公司说不出峰，要么就是杂乱无章，技术人员也说不出来所以然，急死人了

你的产物是用兼并引物扩的吗？是的话就很正常，说明产物里有大小相同或相近的但序列不同的不同基因，方法就是做克隆蓝白斑筛选后挑单菌落去测序，一个板上会测出不同的基因，我的就是这种情况，希望对你有帮助。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-07-20 15:09:56
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xiaoru2010 at 2010-07-20 15:09:56:

你的产物是用兼并引物扩的吗？是的话就很正常，说明产物里有大小相同或相近的但序列不同的不同基因，方法就是做克隆蓝白斑筛选后挑单菌落去测序，一个板上会测出不同的基因，我的就是这种情况，希望对你有帮助。

不是，特异性引物，平端链接比较麻烦
赞一下 回复此楼
5楼2010-07-20 16:04:25
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭