24小时热门版块排行榜    

查看: 2528  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR产物直接测序,不出峰,啥原因? 已有7人参与

如题,最近几个序列测序,PFU扩的,跑胶条带挺亮,结果测序公司说不出峰,要么就是杂乱无章,技术人员也说不出来所以然,急死人了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by xiaoru2010 at 2010-07-20 15:09:56:

你的产物是用兼并引物扩的吗?是的话就很正常,说明产物里有大小相同或相近的但序列不同的不同基因,方法就是做克隆蓝白斑筛选后挑单菌落去测序,一个板上会测出不同的基因,我的就是这种情况,希望对你有帮助。

不是,特异性引物,平端链接比较麻烦
5楼2010-07-20 16:04:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

liouwzh

木虫 (正式写手)


1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-20 16:51:40
实在不行就做TA克隆之后再测序。
2楼2010-07-20 14:32:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

andyduan

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

3楼2010-07-20 14:44:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoru2010


1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-20 16:51:50
引用回帖:
Originally posted by 陈思容 at 2010-07-20 13:40:32:
如题,最近几个序列测序,PFU扩的,跑胶条带挺亮,结果测序公司说不出峰,要么就是杂乱无章,技术人员也说不出来所以然,急死人了

你的产物是用兼并引物扩的吗?是的话就很正常,说明产物里有大小相同或相近的但序列不同的不同基因,方法就是做克隆蓝白斑筛选后挑单菌落去测序,一个板上会测出不同的基因,我的就是这种情况,希望对你有帮助。
4楼2010-07-20 15:09:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 XlxB7q11Bc3x 2026-09-01 3/150 2026-09-01 21:52 by Y3OMSsg8u9zj
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见