| 查看: 1074 | 回复: 5 | ||
[求助]
关于连接转化的问题 已有1人参与
|
|
酶切800bp的片段连接5800bp的载体，酶切4000bp的片段连接5800bp的载体，连接完了用T7通用引物来p，能够p出来，然后用连接体系去转化，平板什么也不长，我用提好的别的质粒做对照，长满了一平板，求助我这是什么问题，做了三个月的连接转化了，再做不出来就想换课题了，求各位大神帮我分析是哪里出了问题 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有211人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于真菌的转化问题
已经有9人回复
- 关于连接、转化、挑取单克隆的问题
已经有3人回复
- 关于双酶切后连接转化，酶切验证切不开。
已经有6人回复
- 关于目的基因与载体连接后转化感受态细胞提取质粒的问题。
已经有8人回复
- 关于连接转化的问题
已经有10人回复
- 关于PCR连接后菌液鉴定的问题
已经有18人回复
- 关于pMD19-T载体连接转化问题
已经有7人回复
- 关于gromacs续跑连接文件的问题
已经有5人回复
- 关于转化的
已经有2人回复
- 关于转化
已经有10人回复
- 关于感受态转化问题
已经有8人回复
- 关于连接转化载体和片段的问题
已经有6人回复
- 关于primestar的转化问题
已经有1人回复
- 虚心请教关于平—粘末端的连接问题
已经有18人回复
- 求助一个关于酿酒酵母转化的问题
已经有19人回复
- 关于重组质粒遗传转化中载体的问题
已经有2人回复
- 求助关于转化的问题？
已经有22人回复
- 关于连接转化的问题
已经有0人回复
- 求助各位高人，关于酶切和连接转化的问题
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于酶切连接转化的问题
已经有10人回复
- 【问题反馈】关于转化问题
已经有8人回复
jcstone1027
铁杆木虫 (正式写手)
木虫
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 7128.8
- 散金: 20
- 红花: 4
- 帖子: 873
- 在线: 142小时
- 虫号: 3433903
- 注册: 2014-09-22
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2017-06-16 11:00:25
3楼2017-06-16 15:38:51
jcstone1027
铁杆木虫 (正式写手)
木虫
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 7128.8
- 散金: 20
- 红花: 4
- 帖子: 873
- 在线: 142小时
- 虫号: 3433903
- 注册: 2014-09-22
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-17 07:45:47
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-17 07:45:47
|
就是说你PCR验证的时候就是用通用引物和序列引物验的吗，如果是这样的话，那就可以排除酶切的问题了，实际上我觉得你还是需要提高片段浓度，比例这些没那么严格，我之前出过问题，罕见的是连接酶有问题，连接效率过低，因为PCR很灵敏，扩出来不代表一定能转化出来，所以就是浓度，还有可以考虑下连接酶的问题。 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2017-06-16 16:14:18
kangaroo0513
新虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 154 (高中生)
- 金币: 2277.4
- 散金: 100
- 红花: 29
- 帖子: 464
- 在线: 119.4小时
- 虫号: 2621902
- 注册: 2013-08-28
- 专业: 细胞物质运输
5楼2017-06-16 22:14:08
 本帖仅楼主可见 |
6楼2017-12-27 01:33:49
