24小时热门版块排行榜    

查看: 3116  |  回复: 6

max小线

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因总是p不出来 已有2人参与

最近在p苎麻的两个基因,大小2000左右,换过三次引物,60-50℃之间的温度试了个遍,cDNA也换过新的,可是就是很难p出来,唯二的两次p出有一点点淡条带,一次是引物没稀释,一次是taq酶的加了1ul,但是胶回收都失败了,已经快崩溃了,求助万能的虫友

基因总是p不出来


发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dna1998

铁虫 (著名写手)

2楼2017-06-11 22:48:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dna1998

铁虫 (著名写手)

3楼2017-06-11 22:49:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

270782719

新虫 (小有名气)



西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-12 23:04:37
考虑用换扩增效率高的Taq或GC buffer全基因合成

发自小木虫Android客户端
4楼2017-06-12 07:24:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlxmiao

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-12 23:05:00
用好的酶,循环数增加,检查引物有没有错,RNA在反转前一定要电泳验证,用DNA模板试一下。

发自小木虫Android客户端
5楼2017-06-12 16:38:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

吕玉平

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议:换一种高效率的Taq酶试一下;可以用基因组扩增一下是否有产物,大小是否正确,这样就能确定引物是否有问题了;cDNA反转后测一下浓度检测一下含量,跑个电泳检测一下质量,根据浓度计算具体需要多大体积的cDNA了。加油。
每天的目标就是过的充实
6楼2017-06-14 15:30:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

矮腿妹的烦恼

新虫 (初入文坛)

7楼2017-06-14 17:05:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 max小线 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 18:01 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:49 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:12 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:57 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:48 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:45 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:13 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:01 by Aj1rhIDL5ixY
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:00 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 10:11 by 23jxep3nCNZb
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 10:01 by 23jxep3nCNZb
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
[基金申请] 面上有专家说实验设备不是我们单位的 +6 zj_muchong 2026-09-08 8/400 2026-09-11 06:56 by suifengdao
[有机交流] 科研求助 10+4 我吃一只鱼 2026-09-07 4/200 2026-09-10 08:32 by 0940628
信息提示
请填处理意见