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用cDNA做PCR扩增不出来。 已有3人参与
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我是一名大二本科生，前两天刚开始用小木虫。想要克隆玉米的一个基因，然后把它转到拟南芥中表达，该基因的cDNA上游GC含量超高，做PCR扩增不出来。 请问各位大佬可以用玉米的DNA做PCR吗？扩出来的序列含内含子对表达会有影响吗? 还请大佬解释一下PCR时用cDNA和DNA做模板，两者有什么区别? @biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端 |
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3楼2017-05-03 07:23:47
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10楼2017-05-03 20:56:56
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六号风(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-05 08:45:41
六号风(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-05 08:45:41
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dna一定不行。。异源表达未必能准确切除内含子，并且也会影响目的基因的表达及其原本的功能。。说回来，拟南芥中表达也不一定能准确展现目的基因功能。。 发自小木虫Android客户端 |
12楼2017-05-04 21:07:50
13楼2017-05-04 21:08:40
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拟南芥是模式植物，用拟南芥就是考虑了周期及操作问题。。主要看你那是一个什么基因，打个比方，如果是促进纤维化 抗倒伏的基因，那在拟南芥中可能不易观察表型。。所以拟南芥适不适合还是要看那是一个什么基因。。 发自小木虫Android客户端 |
15楼2017-05-05 17:55:05
4楼2017-05-03 08:21:14
5楼2017-05-03 08:25:06
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