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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 用cDNA做PCR扩增不出来。
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六号风

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by MAS_rice at 2017-05-03 20:56:56
或者使用高保真酶如kod plus neo

谢谢，我们再去试试

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11楼2017-05-04 07:57:57
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宁文峰

新虫 (小有名气)
★
六号风(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-05 08:45:41
dna一定不行。。异源表达未必能准确切除内含子，并且也会影响目的基因的表达及其原本的功能。。说回来，拟南芥中表达也不一定能准确展现目的基因功能。。

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所追求的不在明天，而在现在以前
12楼2017-05-04 21:07:50
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宁文峰

新虫 (小有名气)
用高GC buffer进行pcr

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所追求的不在明天，而在现在以前
13楼2017-05-04 21:08:40
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六号风

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 宁文峰 at 2017-05-04 21:07:50
dna一定不行。。异源表达未必能准确切除内含子，并且也会影响目的基因的表达及其原本的功能。。说回来，拟南芥中表达也不一定能准确展现目的基因功能。。

那有必要在玉米里表达吗？周期会不会太长?

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14楼2017-05-05 09:02:36
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宁文峰

新虫 (小有名气)
拟南芥是模式植物，用拟南芥就是考虑了周期及操作问题。。主要看你那是一个什么基因，打个比方，如果是促进纤维化 抗倒伏的基因，那在拟南芥中可能不易观察表型。。所以拟南芥适不适合还是要看那是一个什么基因。。

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所追求的不在明天，而在现在以前
15楼2017-05-05 17:55:05
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六号风

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 宁文峰 at 2017-05-05 17:55:05
拟南芥是模式植物，用拟南芥就是考虑了周期及操作问题。。主要看你那是一个什么基因，打个比方，如果是促进纤维化 抗倒伏的基因，那在拟南芥中可能不易观察表型。。所以拟南芥适不适合还是要看那是一个什么基因。。
...

自噬基因

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16楼2017-05-07 09:09:50
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酱紫玥

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by vmp651312 at 2017-05-03 16:46:06
请问你mRNA提取 反转录和PCR都用的什么试剂？

我用的cDNA   gDNA试剂盒

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17楼2017-05-07 12:12:46
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