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梁育松木虫 (小有名气)
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[求助]
做大批量PCR，cDNA过一段时间就扩不出来了，是怎么回事已有1人参与
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| 做大批量半定量PCR前，我用actin做了循环数探索，最终确定用26个循环，并将16个cDNA扩增后调亮度到一致。然后一直用26个循环做目的基因扩增。一星期后，发现扩不出任何条带。再次做循环数探索，发现要34个循环才有电泳条带，然后又得调亮度，好麻烦。我想问，为什么循环数会变化呢？我需要做大量的PCR，如果cDNA老变化，这样不停地探索最佳循环数，调亮度会非常耗时间，影响实验进度，大家有什么好的解决办法吗? |
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njuzhangxin
铁杆木虫 (小有名气)
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- 虫号: 923947
- 注册: 2009-12-09
- 性别: GG
- 专业: 植物保护生物技术
2楼2015-11-02 16:06:28