24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1457  |  回复: 10

qinbanruo

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] pcr, 电泳,DNA条带 已有3人参与

pcr后,电泳跑出来的DNA条带很弱,是怎么问题?

pcr, 电泳,DNA条带


@biostar2009 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

stabilized

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-04-08 08:39:58
我也出过这样的情况,DNA浓度没问题,PCR后有一半的条带不亮。可能是引物和DNA匹配有些差异,比如说我的引物完全按A种青霉DNA设计的,但是PCR的这个DNA是B种青霉的。
你的这个很正常吧,产物分子量很小。溶胶和跑胶严格按照标准来做会好些。
我是同时把循环数+5,引物量加倍,最后做出的图形很漂亮。
坚持!
2楼2017-04-07 16:23:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

卡维斯

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-08 08:40:14
引物二聚体很亮,建议减少引物、提高退火温度
条带太弱,建议适当增加循环、增加模板量或者降低退火温度
3楼2017-04-07 22:23:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流水青苔

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

楼主有空的话,可以做下这样的实验吗?假设现在退火温度为55度,①55-5cycle,56-5cycle,57-5cycle,58-5cycle,59-5cycle,60-10cycle。②60-5cycle,59-5cycle,58-5cycle,57-5cycle,56-15cycle。不喜勿喷,纯属个人想知道结果,如有问题望指正。

发自小木虫Android客户端
4楼2017-04-07 23:25:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

luil121

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

如果是跑胶后染色的话可以考虑下配置新的染液

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-04-08 00:22:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yingxiaoying

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

marker亮不啊 换实验室后发现电泳仪器,染色试剂也很关键
6楼2017-04-10 13:30:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinbanruo

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
2楼: Originally posted by stabilized at 2017-04-07 16:23:38
我也出过这样的情况,DNA浓度没问题,PCR后有一半的条带不亮。可能是引物和DNA匹配有些差异,比如说我的引物完全按A种青霉DNA设计的,但是PCR的这个DNA是B种青霉的。
你的这个很正常吧,产物分子量很小。溶胶和跑胶 ...

嗯嗯,好的,谢谢~有的时候还会出现不出条带的问题

发自小木虫Android客户端
7楼2017-04-13 10:10:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinbanruo

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
3楼: Originally posted by 卡维斯 at 2017-04-07 22:23:28
引物二聚体很亮,建议减少引物、提高退火温度
条带太弱,建议适当增加循环、增加模板量或者降低退火温度

好的,谢谢~~

发自小木虫Android客户端
8楼2017-04-13 10:10:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinbanruo

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
4楼: Originally posted by 流水青苔 at 2017-04-07 23:25:47
楼主有空的话,可以做下这样的实验吗?假设现在退火温度为55度,①55-5cycle,56-5cycle,57-5cycle,58-5cycle,59-5cycle,60-10cycle。②60-5cycle,59-5cycle,58-5cycle,57-5cycle,56-15cycle。不喜勿喷,纯属个人想知 ...

五个循环会不会太少了???

发自小木虫Android客户端
9楼2017-04-13 10:11:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinbanruo

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
6楼: Originally posted by yingxiaoying at 2017-04-10 13:30:28
marker亮不啊 换实验室后发现电泳仪器,染色试剂也很关键

marker 很亮,这些应该都没很大问题,师兄他们也在用,跑出来的带蛮好的

发自小木虫Android客户端
10楼2017-04-13 10:12:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qinbanruo 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 330分求调剂 +7 qzenlc 2026-03-29 7/350 2026-04-01 12:47 by oooqiao
[考研] 070300化学279求调剂 +12 哈哈哈^_^ 2026-03-31 14/700 2026-04-01 11:11 by chemdavid
[考研] 化学0703 调剂 306分 一志愿211 +12 26要上岸 2026-03-28 12/600 2026-04-01 11:10 by chemdavid
[考研] 070300求调剂306分 +5 26要上岸 2026-03-27 5/250 2026-04-01 11:09 by oooqiao
[考研] 322求调剂 +4 熹僖XX 2026-03-31 4/200 2026-04-01 08:21 by JourneyLucky
[考研] 309求调剂 +17 谁不是少年 2026-03-29 17/850 2026-03-31 19:50 by mg1014
[考研] 299求调剂 +8 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 8/400 2026-03-31 18:23 by lizhi8172
[考研] 290分调剂求助 +10 吉祥止止陈 2026-03-25 10/500 2026-03-31 17:54 by 544594351
[考研] 329求调剂,一志愿西北工业大学,材料工程(085601) +6 小小机灵虫 2026-03-29 12/600 2026-03-31 16:58 by 记事本2026
[考研] 一志愿中海洋材料357 +4 麦恩莉. 2026-03-30 4/200 2026-03-31 14:35 by 记事本2026
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 21:07 by peike
[有机交流] 考研调剂 +8 watb 2026-03-26 8/400 2026-03-30 18:40 by 544594351
[考研] 292求调剂 +13 是妍子也是研子 2026-03-30 13/650 2026-03-30 18:01 by 小徐0109
[考研] 0856求调剂 +13 zhn03 2026-03-25 14/700 2026-03-29 08:13 by fmesaito
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +6 崔wj 2026-03-26 6/300 2026-03-29 01:11 by hanserlol
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +7 AZMK 2026-03-28 11/550 2026-03-28 21:01 by xxxsssccc
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
信息提示
请填处理意见