应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 我提取了两个细菌的基因组DNA后，做16S的PCR，电泳结果求分析！
91/1返回列表
查看: 1905  |  回复: 8
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dawn_destiny

新虫 (正式写手)

[求助] 我提取了两个细菌的基因组DNA后，做16S的PCR，电泳结果求分析！已有3人参与

PCR使用的引物及温度均已在图上标注，marker图也已上传，希望大家能帮我分析一下为什么P出来的条带很杂而且在3000bp处始终有条带。谢谢！

我提取了两个细菌的基因组DNA后，做16S的PCR，电泳结果求分析！
55℃.png


我提取了两个细菌的基因组DNA后，做16S的PCR，电泳结果求分析！-1
56℃及58℃.png


我提取了两个细菌的基因组DNA后，做16S的PCR，电泳结果求分析！-2
60℃.png


我提取了两个细菌的基因组DNA后，做16S的PCR，电泳结果求分析！-3
100bp Marker.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2014-12-07 11:33:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

宝杰罗生物

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★
感谢参与，应助指数 +1
dawn_destiny(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-10 20:02:58
Taq酶可能污染了，换一个新的试试，还有PCR条件可能有问题，要提高退火温度，把DNA作一个倍比稀释吧。
赞一下 回复此楼
2楼2014-12-09 16:04:19
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dawn_destiny

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 宝杰罗生物 at 2014-12-09 16:04:19
Taq酶可能污染了，换一个新的试试，还有PCR条件可能有问题，要提高退火温度，把DNA作一个倍比稀释吧。

Taq酶应该是没有污染，我55℃的那个PCR当时还有做另外一个菌，那个菌的P出来16s条带了，还挺亮的，就是这个菌不行。而且我已经把退火温度从55℃提高到60了，还要再提高么？
赞一下 回复此楼
3楼2014-12-10 09:53:20
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

宝杰罗生物

捐助贵宾 (小有名气)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
引用回帖:
3楼: Originally posted by dawn_destiny at 2014-12-10 09:53:20
Taq酶应该是没有污染，我55℃的那个PCR当时还有做另外一个菌，那个菌的P出来16s条带了，还挺亮的，就是这个菌不行。而且我已经把退火温度从55℃提高到60了，还要再提高么？...

继续提高，把模版DNA稀释100倍
赞一下 回复此楼
4楼2014-12-10 12:22:30
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dawn_destiny

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 宝杰罗生物 at 2014-12-10 12:22:30
继续提高，把模版DNA稀释100倍...

可是我之前P的60℃的已经什么条带都没有了呀。要是再提高的话提到多少度比较合适？
赞一下 回复此楼
5楼2014-12-11 09:53:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-12-12 12:24:25
要不做个梯度PCR看看吧，温度就从55-60区间
赞一下 回复此楼
6楼2014-12-11 10:35:57
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dawn_destiny

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-12-11 10:35:57
要不做个梯度PCR看看吧，温度就从55-60区间

哎，我们实验室这边没有那个仪器。
赞一下 回复此楼
7楼2014-12-12 09:17:21
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangwang2010

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你提的模板DNA有没有做过电泳，是纯的条带吗？模板不纯P出来可能会不纯の
赞一下 回复此楼
8楼2014-12-12 13:52:42
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dawn_destiny

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yangwang2010 at 2014-12-12 13:52:42
你提的模板DNA有没有做过电泳，是纯的条带吗？模板不纯P出来可能会不纯の

纯的条带是指只有一个条带么？我的确实不是单一条带呢。
赞一下 回复此楼
9楼2014-12-13 10:56:04
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dawn_destiny 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭