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Yuanfang_818

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[求助] 双酶切胶回收已有5人参与

质粒提取后双酶切4h，跑胶后，条带很暗，但是切来了，胶回收浓度很低，是胶回收的不好吗，道友指导一下，怎么办？

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1楼 2016-07-31 21:48:22

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xiaoxulittle

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★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-01 07:25:31

用的什么内切酶，切这么久？初始质粒有多少？MARKER条带如何？可否给个图？

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2楼2016-07-31 22:20:10

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Yuanfang_818

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2楼: Originally posted by xiaoxulittle at 2016-07-31 22:20:10
用的什么内切酶，切这么久？初始质粒有多少？MARKER条带如何？可否给个图？

用的内切酶是Sac l和Hind lll，实验室一般是酶切4h，他们做的也不是很亮。质粒，20的体系加1ug，50的体系加1.5ug，好像20的体系要好一些。跑胶后，大片段很亮，我要的小片段不亮。也可能我胶回收的不好，自己觉得胶溶解的时间有点长了，其他的应该没啥了。

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3楼2016-08-01 08:21:44

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