版块导航
正在加载中...
客户端APP下载
登录
注册
帖子
帖子
用户
本版
应《网络安全法》要求,自2017年10月1日起,未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用,请尽快对帐号进行手机号验证,感谢您的理解与支持!
24小时热门版块排行榜
>
论坛更新日志
(3812)
>
虫友互识
(508)
>
基金申请
(506)
>
文献求助
(172)
>
论文投稿
(92)
>
导师招生
(73)
>
休闲灌水
(51)
>
招聘信息布告栏
(39)
>
考博
(34)
>
有奖起名
(29)
>
博后之家
(27)
>
催化
(23)
>
硕博家园
(21)
>
论文道贺祈福
(20)
>
绿色求助(高悬赏)
(13)
>
程序语言
(12)
小木虫论坛-学术科研互动平台
»
生物医药区
»
分子生物
»
DNA重组
»
双酶切 胶回收
9
1/1
返回列表
查看: 2557 | 回复: 8
只看楼主
@他人
存档
新回复提醒
(忽略)
收藏
在APP中查看
Yuanfang_818
金虫
(小有名气)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 1090.2
散金: 120
红花: 1
帖子: 183
在线: 39.1小时
虫号: 4076945
注册: 2015-09-16
性别: GG
专业: 水产生物免疫学与病害控制
[
求助
]
双酶切 胶回收
已有5人参与
质粒提取后双酶切4h,跑胶后,条带很暗,但是切来了,胶回收浓度很低,是胶回收的不好吗,道友指导一下,怎么办?
发自小木虫Android客户端
回复此楼
» 猜你喜欢
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠? | Biochempartner
已经有0人回复
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有106人回复
肠道里的"代谢开关":Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
DMXAA:从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner
已经有0人回复
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗
已经有0人回复
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner
已经有0人回复
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
阿莫奈韦(Amenamevir):解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
利瑞鲁单抗:靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体,结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
Wnt-C59:PORCN靶向化学探针,Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:
请问大家 双酶切之后的产物可以冻起来再做胶回收吗
已经有28人回复
带有酶切位点胶回收产物可以与表达载体pet28a直接连接吗?
已经有8人回复
质粒,PCR产物双酶切后胶回收不回来?求大神指导!
已经有49人回复
质粒pic9 用Ecor1 和Not1双酶切,胶回收跑电泳时应该有几条带
已经有1人回复
双酶切
已经有8人回复
双酶切后是否还要胶回收
已经有4人回复
PBI121载体酶切后回收
已经有28人回复
急求酶切,回收及连接详细操作步骤
已经有10人回复
载体双酶切后,胶回收的效率极低,胶回收试剂盒正常,双酶切后的电泳图也正常,
已经有13人回复
双酶切后液体回收
已经有3人回复
双酶切后切胶回收
已经有34人回复
双酶切后目的条带很淡,回收不到
已经有15人回复
各种综合问题:酶切 胶回收 质粒浓缩 测浓度
已经有7人回复
PET-32a双酶切无法回收
已经有8人回复
PGEX为何胶回收时只做双酶切?
已经有7人回复
酶切后胶回收产率太低
已经有2人回复
【求助/交流】双酶切回收柱未晾干,对连接影响大么
已经有19人回复
1楼
2016-07-31 21:48:22
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
xiaoxulittle
新虫
(小有名气)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 148.8
散金: 35
红花: 1
帖子: 60
在线: 11.5小时
虫号: 2974846
注册: 2014-02-18
专业: 免疫生物学
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流
2016-08-01 07:25:31
用的什么内切酶,切这么久?初始质粒有多少?MARKER条带如何?可否给个图?
发自小木虫Android客户端
赞
一下
回复此楼
2楼
2016-07-31 22:20:10
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
Yuanfang_818
金虫
(小有名气)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 1090.2
散金: 120
红花: 1
帖子: 183
在线: 39.1小时
虫号: 4076945
注册: 2015-09-16
性别: GG
专业: 水产生物免疫学与病害控制
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
xiaoxulittle
at 2016-07-31 22:20:10
用的什么内切酶,切这么久?初始质粒有多少?MARKER条带如何?可否给个图?
用的内切酶是Sac l和Hind lll,实验室一般是酶切4h,他们做的也不是很亮。质粒,20的体系加1ug,50的体系加1.5ug,好像20的体系要好一些。跑胶后,大片段很亮,我要的小片段不亮。也可能我胶回收的不好,自己觉得胶溶解的时间有点长了,其他的应该没啥了。
发自小木虫Android客户端
赞
一下
回复此楼
3楼
2016-08-01 08:21:44
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
不爱做实验
银虫
(正式写手)
应助: 37
(小学生)
金币: 316.7
红花: 5
帖子: 399
在线: 68.5小时
虫号: 3124215
注册: 2014-04-09
性别: GG
专业: 生物信息学
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Yuanfang_818: 金币+2,
★★★
很有帮助
2016-08-02 10:52:53
1、酶切时间2-3h即可
2、加大酶切的样品量
3、电泳时间不需要i太长,只要能分开条带即可
4、回收一般没什么问题,保证按步骤操作即可
赞
一下
回复此楼
4楼
2016-08-01 11:02:00
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
小冀-
版主
(著名写手)
应助: 713
(博后)
贵宾: 3.033
金币: 11446.9
散金: 1055
红花: 82
帖子: 2509
在线: 445.9小时
虫号: 1521695
注册: 2011-12-03
性别: GG
专业: 生物信息学
管辖:
微生物
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Yuanfang_818: 金币+2,
★★★
很有帮助
2016-08-02 10:53:24
你都说了,条带很暗,估计回收出来浓度也不会太高~以后酶切的时候在不超量的情况下尽量多加点质粒,切时间长点也没关系的,这样回收浓度比较高,后续实验也方便做~
赞
一下
回复此楼
···
5楼
2016-08-02 10:22:12
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
swgcpy
至尊木虫
(著名写手)
应助: 3
(幼儿园)
金币: 16493.5
红花: 1
帖子: 1142
在线: 84.8小时
虫号: 1099648
注册: 2010-09-15
性别: GG
专业: 生物技术药物
快切酶37℃一小时足矣,慢切酶要比较彻底的话最好过夜。另外切完直接跑胶条带很暗的话就不是回收的问题了,是开始反应的质粒量就比较少
发自小木虫Android客户端
赞
一下
回复此楼
6楼
2016-08-03 00:25:23
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
cry_2013
木虫
(正式写手)
应助: 47
(小学生)
金币: 1960.8
散金: 342
红花: 6
帖子: 366
在线: 246.6小时
虫号: 3426497
注册: 2014-09-18
性别:
MM
专业: 兽医传染病学
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Yuanfang_818: 金币+2
2016-08-03 17:33:31
酶切后跑胶条带都不亮,会不会是你提的质粒浓度就低呀?
赞
一下
回复此楼
7楼
2016-08-03 08:54:18
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
十四_14
荣誉版主
(正式写手)
应助: 34
(小学生)
贵宾: 0.024
金币: 2328
散金: 20
红花: 11
帖子: 620
在线: 223.2小时
虫号: 1723018
注册: 2012-03-28
性别:
MM
专业: 生物化学
管辖:
生物科学
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Yuanfang_818: 金币+2
2016-08-03 17:32:34
一般来说 胶回收这一步 只要按照步骤来 溶液没问题 是不会有什么问题的
我觉得可能你的酶切产物本来浓度就不高 回收后会有一点损失 所以条带不亮 多切几管吧
赞
一下
回复此楼
8楼
2016-08-03 11:11:31
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
feierorange
铜虫
(小有名气)
应助: 17
(小学生)
金币: 199.6
散金: 31
帖子: 134
在线: 70.3小时
虫号: 1605430
注册: 2012-02-08
专业: 微生物资源与分类学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
不知道你说的小片段是指多小,以我的经验,双酶切胶回收电泳时,小片段是会比较弱,如果担心的话,可以采用楼上所说多切几管。
赞
一下
回复此楼
9楼
2016-08-03 13:21:55
已阅
回复此楼
关注TA
给TA发消息
送TA红花
TA的回帖
相关版块跳转
新药研发
药学
药品生产
分子生物
微生物
动植物
生物科学
医学
我要订阅楼主
Yuanfang_818
的主题更新
9
1/1
返回列表
如果回帖内容含有宣传信息,请如实选中。否则帐号将被全论坛禁言
普通表情
龙
兔
虎
猫
百度网盘
|
360云盘
|
千易网盘
|
华为网盘
在新窗口页面中打开自己喜欢的网盘网站,将文件上传后,然后将下载链接复制到帖子内容中就可以了。
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭
确定