我在做一个弧菌的基因敲除，使用的是利用自杀质粒的双交换同源重组方法。我将含有重组质粒的大肠杆菌和弧菌涂布到双抗板(弧菌抗氨苄，质粒上有卡那的抗性基因)上后，取长出来的菌做pcr，引物是融合同源臂两端的引物，理论上条带应该有两条，一条是融合同源臂的，一条是上下同源臂间夹着待敲除基因的。但现在只有融合同源臂的条带，我想请问下大家这是怎么回事，是因为自杀质粒选的不好导致它复制了吗？急，请求大家的帮助。

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