酶容易降低酶活怎么办？
用大肠杆菌表达胞内酶，每次都是从-80℃划线后再培养的，但发现前几次实验酶活还可以，后面重复的时候发现酶活降低了很多，培养条件都是一样的……很是惆怅……
有大佬了解是什么原因吗？还有，大肠杆菌菌体如果放冰上过夜再破壁的话，会对酶活有影响吗？
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大肠杆菌冰上过夜会对酶活有影响。很多酶都不稳定，随着冻融或放置活性会降低。
酶活测量是用菌液还是纯化后的蛋白？如果是菌液的话，最好先定量一下表达水平，不要默认每次表达水平一样。
纯化蛋白尽量在一天内完成，除非需要透析，