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构建突变文库,所用超级感受态的制备

作者 桧h桧桧
来源: 小木虫 200 4 举报帖子
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用实验室自制的氯化钙法感受态来构突变库,长菌量不太理想。经费原因,只能自己做感受态,看网上常见的Inoue法制备超级感受态似乎不适合BL21啊。

有没有人好心人分享一下适合做BL21超级感受态的protocol 先在此谢过啦

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  • 精华评论
  • choujiaoqi

    jm109我做过,效果不比公司差,只是保存时间没公司那么长

  • 雨独步

    第一,建库一般使用电转感受态,电转感受态制作很简单,菌液OD长到0.6后预冷,使用预冷的去离子水洗三遍就行了;第二,BL21(DE3)转化效率本身就不高,如果库容量到几十上百万,建议先转MC1061等菌株,刮板提取质粒后再转入BL21(DE3)进行筛眩�

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