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无痕敲除抗生素失效

作者 caichenggu
来源: 小木虫 200 4 举报帖子
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最近在用自杀质粒pk18mobsacb敲除红球菌的基因,在敲除一个目的基因后,再敲下一个基因的时候电转质粒后用卡娜霉素筛选的时候平板长出了大量菌落,挑取了一些菌落均为没有进行一轮同源交换的菌,而对照组没有转质粒的平板却没有菌生长,苦思冥想不知道什么原因,有哪位前辈曾经遇到过这种问题吗,请指教一下 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • forhighbio

    红球菌有专门的敲除质粒系统吧

  • caichenggu

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by forhighbio at 2020-07-08 17:03:31
    红球菌有专门的敲除质粒系统吧

    这个质粒是可以的

  • forhighbio

    我公司一般用Sacb系列的质粒,敲除阴性菌

  • 赤月雪

    这个质粒是经过两轮同源重组敲基因的啊,在卡那上能长,应该是经过一轮重组,你还得用15%蔗糖筛两轮重组后的阳性克隆啊

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