抗原同其抗体的偶联方法
各位同仁好,
最近在设计试验的遇到一个问题,不知道该怎么解决,特向有经验的同行请教,感谢大家的回复!
我的问题是:我有一个心肌肌钙蛋白I的全长抗原(真核表达、原核表达都有),也有多种抗心肌肌钙蛋白I的单抗,现在我想把心肌肌钙蛋白I的抗原和抗心肌肌钙蛋白I的抗体通过化学方法共价偶联,得到一个抗原-抗体偶联物,作为其他项目的一种质控品。可以怎么操作呢?
我的想法是:
1、先将抗体的抗原结合区域切除,再进行偶联,但是可能存在切除不完全,也会丧失某些表位;
2、通过某种试剂对可变区进行封闭,然后偶联,偶联完成再将封闭位点释放,但是我不知道有没有这样的试剂,释放后会不会有自行结合了,可不可行,会不会对蛋白产生不好的影响;
3、不理会抗原抗体的结合,保证抗原/抗体中的某一种严重过量,按照偶联过程进行操作,偶联物过层析柱纯化,层析柱可以特异性结合耦联试剂(偶联试剂为小分子,纯化前经过透析除去),但是可行性未知。
以上均为个人想法,尚未付诸实施,不知道是否有大神进行过相关操作,能否指点一二,感激不尽!
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祝顺利