没有芳香环吸收的多肽如何确定浓度
合成了个多肽,用hplc纯化完了,质谱测分子量也对
但不知道纯化完了产率多少
这才想起来多肽里没有Phe, Tyr, Trp之类的带芳香环的氨基酸, 260或280左右没有吸收没法算浓度啊
因为做了个很昂贵的反应, 大概只投了6 mg的原料~~~而且hplc纯化完了估计里面还有些盐,所以把溶剂除去后称质量肯定没希望
HPLC纯化的时候是测的215nm,肽键的吸收,可是能吸收这波长的官能团也太多了, 我这里面还有什么Arg和triazole之类的基团,没法计算啊
惨了,本来这合成里面就用到些老贵的东西了,结果做出来不知道里面浓度多少没法应用
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跑tricine sds-page，有个几微克就够了。积出marker的条带深浅和样品的条带深浅，然后计算浓度。
虽然不非常准，但是基本也差不了多少。
我这多肽一共就8-10个氨基酸,分子量1.5kDa, 上胶估计就直接跑没了
梯度洗脱或许效果会好一些
所以要跑tricine sds-page啊，普通的胶不行的。
给你发了个图，网上下的，1kda都能跑出来。
images.jpg
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