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苯酚氯仿异戊醇,无水乙醇沉淀DNA 效率很低怎么办

作者 yanglinhui
来源: 小木虫 850 17 举报帖子
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  • 精华评论
  • gastrodia

    沉淀效率低,怎么个低法?你实验大致流程怎样?你不说,大家怎么知道问题是出在哪一步?

  • holyala

    这种操作应该不存在什么效率低的问题吧?~~~我觉得可能倒乙醇的时候容易把沉淀弄掉,这样损失就很大..

  • MellonCHEN

    苯酚氯仿异戊醇,无水乙醇沉淀DNA 的效率不会很低的,这个方法很常用的。会不会是你离心后弃上清的时候,把沉淀一起倒掉了。

  • yanglinhui

    加等体积的苯酚氯仿异戊醇,离心取上清,再加入十分之一体积的醋酸钠,之后再加俩倍量的无水乙醇,沉淀20分钟,再离心20分钟,最后70%酒精洗沉淀,最后用水溶解。
    这样做回收率只有10%  导师说应该到90%才对呢  做了好多次都达不到,

  • 陈思容

    我前段时间也是用这种方法提的,不过没用试剂盒,试剂都是自己配的,结果就把Maker跑出来了!现在怀疑是酚:氯仿:异戊醇配置的问题,有哪位高手指导一下

  • ychh521

    可以加入等体积的-20度过夜的异丙醇沉淀DNA,也可以加入2倍体积的-20度过夜的无水乙醇沉淀DNA。

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