刚刚看了一篇论文，在基因敲除的时候，仅仅是在染色体上需要敲除的基因内部插入一个抗性基因，而没有用抗性基因置换下需要敲除的基因，这样是不是这个基因和抗性基因会同时转录？

是仅仅在需要敲除的基因内部插入好还是置换下来好呢？还是这两种方法都可以，没有区别呢？

望老鸟给与指导，谢谢！

插入敲除跟置换敲除在试验操作及难度上差不多吧，置换敲除只不过是构建质粒时切除部分基因再连入抗性基因而已。

因为我的基因内部只有一个合适的位点，其他的位点不适于做敲除，要不就是靠基因两端太远，要不太近。所以只能插入了，插入的抗性基因会不会掉下来造成恢复突变呢？

同时请问如何根据试验目的选择敲除方法呢，我的目的就是使基因不能表达（最好连没活性的蛋白也不能表达），该用什么方法？

[ Last edited by caiqingchong on 2009-6-3 at 11:00 ] 返回小木虫查看更多