据说是能让峰分的更开。可以做做预实验。

1.防止流动相长菌
2.使系统的PH值为酸性，有利于峰的分离

反相柱子啊 ！ 酸性溶液提供极性使蛋白结合上去！

然后用非极性的试剂梯度洗脱，如甲醇或者乙腈。

反相柱纯化就是基于流动相极性的转换啊。
所以必须要用啊嘎嘎

或者你不加也可以 但是可能你要探索条件

水可以直接作A缓冲液 因为水也有一些极性

由于反相柱常用的介质是硅胶基质的C18，介质表面残存有少量未封端的羟基，这部分羟基在流动相中容易解离，导致色谱图形变坏或是分离失败。而TFA（三氟乙酸）是一种强离子对试剂，通过解离出氢离子来抑制羟基的解离，因此，TFA是最常用的一种色谱助剂，

如果反相柱是C18，而被分析物是蛋白质等具有等电点的生物分子，一般都需要加入TFA，如果反相柱是聚苯乙烯（最常用的是source），就不用添加TFA了