质粒形态不同，有开环超螺旋等质粒的存在

你描述的不清楚，以质粒为模板干啥了呀，PCR吗？你跑的是PCR产物还是质粒？跑的是PCR产物的P出两条带说明引物或者PCR条件特异性不好呀；如果跑的质粒的话很正常呀，调一调亮度对比度说不定还有三条带呢

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