双酶切连接测序结果比对连入了其他的一段莫名其妙的序列，求其原因谢谢
做一个很简单的双酶切后载体与片段连接的实验，但测序结果回来在两个选定酶切位点之间总是BLAST出其他的序列，根本不是我的目的片段，空载体也测序了没有问题，片段是双酶切胶回收的，大小也正确，很奇怪，各位大佬帮忙分析有什么原因呗！
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莫名奇妙的基因比对结果呢？是不是操作污染了
不知道哎
，
载体没问题，那肯定是片段有问题咯，片段测序看看
我们一般是先把片段连接在pEASY载体，测序正确后再进行双酶切，这样就可以判断是否是操作问题
会不会是片段本身错误？可以先测一下片段序列是否正确，然后再做酶切连接